一种适合聚合酶链反应的真菌单孢子或多孢子的破壁方法

摘要：

一种适合聚合酶链反应(PCR)的真菌单孢子或多孢子的破壁方法，包括真菌单个或多个孢子的取得与放置、用破壁针对孢子破壁使DNA释放、将DNA注入到聚合酶链反应管的反应液中混合等方法，通过该方法可获取单个或多个真菌孢子的DNA分子，DNA不丢失，不降解，完全能够满足直接PCR反应的需要以及进行以PCR为基础的各种分子生物学反应的的需要。采用本发明，不需要对真菌进行分离培养，真菌的检测速度提高几十倍，只少量真菌孢子甚至一个孢子就能进行分子生物学鉴定或检测，其意义十分重大。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01125009.7

申请日期：2001-08-01

公开/公告号：CN1334345

公开/公告日：2002-02-06

主分类号：C12Q1/37

申请/专利权人:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局

发明/设计人:章桂明;程颖慧

主申请人地址:518010广东省深圳市和平路2049号深圳出入境检验检疫局动植物与食品检验技术中心

专利代理机构:深圳市专利服务中心

代理人:王雄杰

国别省市代码:广东;44

权利要求：

权利要求书1、一种适合聚合酶链反应的真菌单孢子或多孢子的破壁方法，其特征在于：包括如下步骤：1)从病组织或菌瘿或洗涤液或从培养物配成的孢子悬浮液中取得单个或多个真菌孢子，并直接放置在聚合酶链反应的反应管中；2)用破壁针对放置在聚合酶链反应的反应管中的单个或多个真菌孢子破壁，使孢子的内含物DNA释放出来；3)将聚合酶链反应的反应液直接加于聚合酶链反应的反应管中，充分震荡离心，使孢子的内含物DNA混入反应液中。