定性定量用脱氧核糖核酸标准参照物的制备方法
本发明利用限制性内切酶完全酶解法制备定性定量用脱氧核糖核酸(DNA)标准参照物。这一目标通过控制不同长度标准参照物片段和各个片段的不同拷贝数来达到。各不同片段的共同特征是其硷基数目都等于基本定长的整数倍。这一标准参照物重组DNA分子通过扩增和纯化后进行限制性内切酶的完全消化。凝胶电泳时不同带之间根据在DNA标准参照物的设计时其在重组DNA分子中的拷贝数目的特异性而存在准确的定量关系。
发明专利
CN01119959.8
2001-07-04
CN1329172
2002-01-02
C12Q1/68
张旭
张旭;张佳;李凯
300192天津市南开区白堤路龙兴里(南大宿舍)6号楼1门302
天津;12
权利要求书1、一种对来源于质粒、病毒、噬菌体、酵母的天然DNA分子进行基因重组以制备定性定量用脱氧核糖核酸(DNA)标准参照物的方法,其特征在于,该重组DNA分子从限制性内切酶辨认位点来看是由多种不同定长片段的不同拷贝数所形成的重组分子,本发明包括以下几个步骤:a、制备含有限制性内切酶位点的DNA标准参照物重组DNA分子;b、将重组DNA分子进行扩增;c、通过使用限制性内切酶对重组DNA分子进行完全酶解以制备不同大小的DNA片断。