一种纳米金颗粒原位多次扩增检测生物分子的方法
本发明涉及一种纳米金颗粒原位多次扩增检测生物分子的方法，首先制备成纳米金颗粒的生物探针1，用与待检测的DNA分子互补的巯基DNA或配体分子制备探针2，然后使待检测的DNA分子或者待检测的蛋白受体分子结合在探针2上，再使纳米金颗粒固定在检测仪器的样品台表面，最后使用扩增试剂对纳米金颗粒进行原位多次扩增，即可进行对生物分子的检测。本发明方法具有检测灵敏度高、操作简便、快速等优点。
发明专利
CN01118134.6
2001-05-18
CN1321776
2001-11-14
C12Q1/68
清华大学
马占芳;隋森芳
100084北京市海淀区清华园
北京清亦华专利事务所
罗文群
北京;11
权利要求书1、一种纳米金颗粒原位多次扩增检测生物分子的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将颗粒度小于30nm的金颗粒水溶液与浓度大于0.01μg/mL、pH值为5-9的巯基DNA缓冲溶液，或与浓度大于0.01μg/mL、pH值为5-9的配体分子缓冲溶液，按照金颗粒与巯基DNA或与配体分子的摩尔比为1∶1-1000的比例，在20-60℃的条件下混合，时间大于30分钟，制备成纳米金颗粒的生物探针1；(2)用与待检测的DNA分子互补的巯基DNA或配体分子制备探针2：在20-60℃的条件下，用浓度大于0.1μg/mL、pH值为5-9的巯基DNA缓冲溶液，或与浓度大于0.1μg/mL的pH值为5-9的配体分子缓冲溶液，浸泡检测仪器的样品台表面，时间大于2小时，使探针2固定在检测仪器的样品台表面；(3)用pH值为5-9的待检测的DNA分子缓冲溶液，或pH值为5-9的待检测蛋白受体分子缓冲溶液，在20-60℃的条件下，浸泡已经固定了探针2的检测仪器的样品台表面，时间大于30分钟，使待检测的DNA分子或者待检测的蛋白受体分子结合在探针2上；(4)在20-60℃的条件下，用纳米金颗粒的生物探针1浸泡检测仪器的样品台表面，时间大于30分钟，使纳米金颗粒固定在检测仪器的样品台表面；(5)配制浓度大于0.001％的氯金酸水溶液或pH值为4-9的氯金酸缓冲溶液以及浓度大于0.01mmol/L的羟胺水溶液或羟胺缓冲溶液作为扩增试剂，对固定在检测仪器的样品台表面上的纳米金颗粒进行原位多次扩增，使纳米金颗粒的尺寸增大，每次扩增时间大于0.5分钟，即可进行对生物分子的检测。