人源性肝细胞生长刺激因子cDNA克隆和序列

摘要：

本发明公开了利用简并PCR技术从人胎肝cDNA文库扩增出目的片断，并以此为探针进行核苷酸杂交筛选人胎肝cDNA文库，成功获得目的基因HDSSF克隆，其cDNA链为792bp，含有594bp的完整开放续码框架和5’及3’末端非编码区序列。本发展为下一步开展人源性HDSSF的重组产品研制和生产该基因产品奠定了基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01114478.5

申请日期：2001-05-23

公开/公告号：CN1386857

公开/公告日：2002-12-25

主分类号：C12N15/11

申请/专利权人:苏先狮

发明/设计人:苏先狮;唐世刚

主申请人地址:410011中国湖南省长沙市人民路86号

专利代理机构:湖南兆弘专利事务所

代理人:赵洪%杨慧

国别省市代码:湖南;43

权利要求：

权利要求书1、一种人源性肝细胞生长刺激因子cDNA克隆和序列，其特征在于采用从乳猪肝组织中纯化的肝脏刺激物质HDSSF测定的部分氨基酸序列，合成简并引物，依据同源克隆的原则，利用简并PCR技术从人胎肝cDNA文库扩增出目的片断，并以此为探针进行核酸杂交筛选人胎肝cDNA文库，从而获得目的基因HDSSF克隆，其cDNA链为792bp，含有594bp的完整开放续码框架和5’及3’末端非编码序列，该序列显示HDSSF为一个含有198个氨基酸残基的促肝细胞生长因子，HDSSF核苷酸序列在ABI PRISMTM377XL DNA测序仪上以末端终止法进行HDSSF核苷酸序列测定，该序列为：AAAAGCTGTA GTGGGTTTGT AGCCAGGATG ACAGCGGTACCTTAACACAG TCCCAACAAC ATACACATCC TCTTTTGTCGGCCTAGGATA TGTTTCCCAG GAAGCATGTG GAATGTCTGGTAAATTAATA CAACTATTGG GCTCACAAGC AGGAGGAGAAGGATTCCATT TGCTATCAGC ATCACAATGA ATTACACTGCTGCCTCTGAG AACAAAACC TTTTTGGCAC TTAAACACAATAGTGTCTTT GTAATTATAG ATGGGTCCAA ATCCAGAGACCATTTCCCCA TGTGAAACAT CTGGCTTGCG ACAGGTGATTTTTTCACAGG TAGGAGGGCTT GGTCTCCAAA CGCCTATTGTTTCATTCTCC ACAGTGCAAG AAATGGAGGC ATGGCCCAAGAGTGAGAAGC GGGGGTCACA GCTGTAGGTG ACAGAAAAGCCGTATGCGTA GAAATTTTCT TCACCGCTGT GCCTTCCATTCCTGATGTCT GGAGGAGGCT TACACTTGAC AATTTCACATTGTGGGAGAG GATGACTCCA GCCAACTCCT CTATCTTGGACTTCACAACG ACTAGTGGTT GAGCCAATTA AGAAAAA