人类基因短串联重复序列分型标准物的分子克隆制备方法

摘要：

本发明公开了一种用分子克隆技术制备人类短串联重复序列基因座(STR)等位分型标准物的方法。它的最大特点是将PCR扩增获得的STR等位基因片段与质粒载体重组，装载有STR等位基因片段的重组质粒既可以通过细菌大量繁殖，也可以重组质粒为模板进行PCR扩增，制备出大量等位基因片段，最后通过简单的纯化、混合便可获得大量优质STR等位基因分型标准物。本发明制备的STR等位基因分型标准物具永久的同一性和国际统一的标准命名，可以解决STR在分型上长期存在准确性和标准化问题。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01107235.0

申请日期：2001-03-05

公开/公告号：CN1312371

公开/公告日：2001-09-12

主分类号：C12N15/09

申请/专利权人:四川大学

发明/设计人:张林;辛军平;陈国弟;饶莉

主申请人地址:610041四川省成都市人民南路三段十七号四川大学法医学院（张林收）

专利代理机构:四川省中亚专利事务所

代理人:杨志敏

国别省市代码:四川;51

权利要求：

权利要求书1、一种人类基因短串联重复序列分型标准物的分子克隆制备方法，其特征在于它包括下列步骤：(1)用聚合酶链式反应扩增获取待克隆的人类DNA短串联重复序列基因座的大小不同的各等位基因片段：(2)将上述扩增的等位基因片段与质粒载体重组，重组质粒再转染至感受态细菌中培养和繁殖，然后选出已含有插入片段正确的克隆；(3)DNA测序分析上述获得的重组质粒中的等位基因片段的序列并按国际统一标准命名；(4)用经测序证实含有正确等位基因插入片段的重组质粒为模板，进行聚合酶链式反应扩增，其产物经纯化、混合后即获得相应的等位基因分型标准物。