中国棉铃虫病毒几丁质酶基因

摘要：

本发明通过克隆和序列测定获得中国棉铃虫病毒几丁质酶基因，它位于HaSNPV基因组的96.1kb－97.8kb处，编码区全长为1713bp，编码一个大小为570个氨基酸的蛋白质产物，它具有真核穿膜信号肽、催化活性区及内质网定位序列。将其克隆入原核表达载体，可以在大肠杆菌中表达出一种分子量为57～65 KDa的几丁质酶蛋白。该基因可用于新型杆状病毒表达载体及病毒杀虫剂的构建，其表达产物可用于抗真菌制剂及病毒杀虫剂增效剂的生产。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01106469.2

申请日期：2001-02-13

公开/公告号：CN1308126

公开/公告日：2001-08-15

主分类号：C12N15/56

申请/专利权人:中国科学院武汉病毒研究所

发明/设计人:吴东;彭辉银;孙修炼;陈新文;张双民;胡志红

主申请人地址:430071湖北省武汉市武昌小洪山中区44号

专利代理机构:湖北省专利事务所

代理人:王守仁

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

权利要求书1．一种中国棉铃虫病毒几丁质酶基因，其特征是所述的几丁质酶基因具有编码、内切几丁质酶活性、潜在的抗真菌活性和病毒杀虫剂增效活性的蛋白质的功能，其核苷酸序列及预计的氨基酸序列如下：ATAAGTACTATAAATTACACAAAATAAATATGAATAATTATTGTTTGTATTTGTTTGCTTTTAGTATTTTAATATTM N N Y C L Y L F A F S I L I LACATAGCTACGCTGCTCCACCCGGCGTTCCCACATTAGACTGGGCCGATCACAGTTACGCTTTAGTGCAAATAAATH S Y N A P P G V P T L D W A D H S Y A L V Q I NCATCAAGCCACCGCTTACGAATCATTAGTAAACTCTCAACCGTTTGTAACTATCAAAGTATCATGGAGCGTATGGTH Q A T A Y E S L V N S Q P F V T I K V S W S V W SCGGGCGAACAAGGCGAAATCGCTCAAGTGTATCTAGAAAATAAACTAGACTGCAAAGTAATCAACGTTTGGACTGGG E Q G E I A Q V Y L E N K L D C K V I N V W T GTCCGACGCAAGATCGTTTTGCTACTTTTGATTACAATACGAGCGGTCGTTATTCGATGTATGTAAAACTGTGCAATP T Q D R F A T F D Y N T S G R Y S M Y V K L C NGCCGACGGCTGTTCGGCTAGTCAAACCGTAGAAGTCGTGATCGCAGACACCGATGGTAAACATTTAAAACCGTTACA D G C S A S Q T V E V V I A D T D G K H L K P L QAATACACGTGGCAAGAAAACAATAAACCGTATACGTACAACACTGATCACACCGTAGCGGCCTATTTTGTCGAATGY T W Q E N N K P Y T Y N T D H T V A A Y F V E WGGGCGTTTACGGTCGATCTTTTCCCGTGGACAAAGTGCCCACGCCGAACCTTTCGCACATTTTATACGGATTTATAG V Y G R S F P V D K V P T P N L S H I L Y G F ICCGATTTGCGGCGGTGACGGTATAAACGACAGTTTAAAATCTATCACGGGGAGTTTTGAAGCGTTGCAAAGATCGTP I C G G D G I N D S L K S I T G S F E A L Q R S CGCGCTGGCAGGGACAATTTTAAAGTTTCCATACACGATCCGTGGGCGGCGCTCCAAAAACCACAAACAGGCGTTAGA G R D N F K V S I H D P W A A L Q K P Q T G V SCGCATGGAACGAACCCTACAAAGGCAATTTTGGTCAATTAATGGCAGCAAAATTGGCCAATCCCAATCTAAAAGTGA W N E P Y K G N F G Q L M A A K L A N P N L K VTTGGCATCAATCGGCGGTTGGACACTGTCCGATCCCTTCTATCATATGCACGATGCGCGAACGCGACAAATTTTTGL A S I G G W T L S D P F Y H M H D A R T R Q I F VTCGAATCCGTGCGTGAATTTGTGTTGACATGGAAATTTTTCGACGGCATCGATATTGATTGGGAATTTCCGGGCGGE S V R E F V L T W K F F D G I D I D W E F P G GCAAAGGCGCCAATCCAAACGTTGGCGATGTGGAACGCGACAATAACACGTATATCGCTTTATTGGGCGAATTGCGCK G A N P N V G D V E R D N N T Y I A L L G E L RGCCATGCTCGATCAAGTTCAAATACAAACGAATCGTACTTTAGAACTCACCACAGCGATTAGCGCTGGCATAGACAA M L D Q V Q I Q T N R T L E L T T A I S A G I D KAGATCGCCGCGGTTAATTACGACCGAGCACAACAGTATTTAGATAAAATTTTCGTGATGAGTTATGATTTCAAAGGI A A V N Y D R A G Q Y L D K I F V M S Y D F K GAGCTTGGTCTAATACCGATCTCGGTCATCAGACGGCACTGTACGGTTCCGCGTGGAAACCTAACGAACCGTACACCA W S N T D L G H G T A L Y G S A W K P N E P Y TGCCAACGTGGCCGTGGACGCTTTGCTCGCGCAACGAGTGAATCCAAAAAAACTCGTGTTGGGCGTAGCAATGTACGA N V A V D A L L A G R V N P K K L V L G V A M Y GGCCGCGGTTGGACGGGCGTCCACAACTACAACAGTGACAATCCATTCAGTGGCGTAGCCGTCGGACCGATCACGGGR G W T G V H N Y N S D N P F S G V A V G P I T GTACATGGGAAAACGGCGTGGTCGACTACAGACAGATTGCTAAAAACATTTCGCGTTACGAATACGCATTCGACGACT W E N G V V D Y R Q I A K N I S R Y E Y A F D DGTGGCCAAGGCTGCGTACGTATTCGACCGCGCCTCTGGCGACTTAATATCGTATGACAGCGAAAGATCGGTACTGGV A K A A Y V F D R A S G D L I S Y D S E R S V L ACCAAAGGCGAATACGTGCTTCAGCGTAGACTCGGCGGATTATTCGCATGGGAAATCGATGCGGACAACGGCGATTTK G E Y V L Q R R L G G L F A W E I D A D N G D LGCTCAACGCTATGCATATTGGCTTGATGAAAACAGGTACAAACAGTAGATTGATTCATAACGAATTGTAAL N A M H I G L M K T G T N S R L I H N E L上述编码区全长1713核苷酸，编码一个大小为570个氨基酸的蛋白质产物，几丁质酶基因位于1HaSNPV基因组的96.1kb-97.8kb处，具有真核穿膜信号肽，位于第1～20个氨基酸残基区；具有催化活性区，位于第308～316个氨基酸残基区；具有内质网定位序列。2