用基因工程方法生产增强其生物活性的红细胞生长因子二联体/三联体融合蛋白

摘要：

本发明涉及一种用基因工程方法生产增强其生物活性的红细胞生长因子二联体／三联体融合蛋白。该方法把两个／三个相同的能表达红细胞生长因子的基因通过一段／两段多肽连接起来，并接入哺乳动物细胞表达质粒，将其转入哺乳动物细胞后得到了表达。融合蛋白不仅具有红细胞生长因子的生理活性，而且延长了蛋白在生物体内的储留时间，进而增强其生物功效，延长体内半衰期，减少用药次数，极大地提高了红细胞刺激因子的临床实用价值。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN01104265.6

申请日期：2001-02-27

公开/公告号：CN1305003

公开/公告日：2001-07-25

主分类号：C12N15/62

申请/专利权人:李欣越

发明/设计人:李洪兴

主申请人地址:130042吉林省长春市北安路南二胡同103栋304

专利代理机构:上海华东专利事务所

代理人:高存秀

国别省市代码:吉林;22

权利要求：

1，一种用基因工程方法生产的增强其生物活性的二联体/三联体融合蛋白，其特征在于：该结构包括在两单体中间有一段连接片段为二联体融合蛋白，或在其三单体中间有两段连接片段为三联体融合蛋白；并具有红细胞生长因子的蛋白自然顺序，其二联体融合蛋白的生物活性为135,000IU/mg；三联体融合蛋白的生物活性为150,000IU/mg；二联体融合蛋白具有如下所示的序列：EPO-L-EPOMGVHECPAWLWLLLSLLSLPLGLPVLGAPPRLICDSRVLERYLLEAKEAENITTGCAEHCSLNENITVPDTKVNFYAWKRMEVGQQAVEVWQGLALLSEAVLRGQALLVNSSQPWEPLQLHVDKAVSGLRSLTTLLRLGAQKEAISPPDAASAAPLRTITADTFRKLFRVYSNFLRGKLKLYTGACRTGDRGGSGGGSAAGGSGGAPPRLICDSRVLERYLLEAKEAENITTGCAEHCSLNENITVPDTKVNFYAWKRMEVGQQAVEVWQGLALLSEAVLRGQALLVNSSQPWEPLQLHVDKAVSGLRSLTTLLRALGAQKEAISPPDAASAAPLRTITADTFRKLFRVYSNFLRGKLKLYTGEACRTGDR三联体融合蛋白具有如下所示的序列：EPO-L-EPO-L-EPOMGVHECPAWLWLLLSLLSLPLGLPVLGAPPRLICDSRVLERYLLEAKEAENITTGCAEHCSLNENITVPDTKVNFYAWKRMEVGQQAVEVWQGLALLSEAVLRGQALLVNSSQPWEPLQLHVDKAVSGLRSLTTLLRALGAQKEAISPPDAASAAPLRTITADTFRKLFRVYSNFLRGKLKLYTGEACRTGDRGGSGGGSAAGGSGGAPPRLICDSRVLERYLLEAKEAENITTGCAEHCSLNENITVPDTKVNFYAWKRMEVGQQAVEVWQGLALLSEAVLRGQALLVNSSQPWEPLQLHVDKAVSGLRSLTTLLRALGAQKEAISPPDAASAAPLRTITADTFRKLFRVYSNFLRGKLKLYTGEACRTGDRGGSGGGSAAGGSGGAPPRLICDSRVLERYLLEAKEAENITTGCAEHCSLNENITVPDTKVNFYAWKRMEVGQQAVEVWQGLALLSEAVLRGQALLVNSSQPWEPLQLHVDKAVSGLRSLTTLLRALGAQKEAISPPDAASAAPLRTITADTFRKLFRVYSNFLRGKLKLYTGEACRTGDR<!-- 1 -->