微载体培养中国仑鼠卵巢细胞生产异源性分泌蛋白质的方法

摘要：

本发明涉及以无血清细胞培养液在微载体上培养转化的CHO细胞产生异源性分泌性蛋白质的方法。该方法避免了培养哺乳动物粘附性细胞生产分泌性蛋白所见的一个问题，即从含血清环境换成无血清环境时出现的生产滞后期问题。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN00812332.2

申请日期：2000-09-01

公开/公告号：CN1373799

公开/公告日：2002-10-09

主分类号：C12N5/06

申请/专利权人:应用研究系统ARS股份公司

发明/设计人:M·坎宁安;T·伊勒

主申请人地址:荷属安的列斯群岛库拉索市

专利代理机构:上海专利商标事务所

代理人:余颖

国别省市代码:荷属安的列斯;AN

权利要求：

权利要求书1.一种在微载体上培养CHO细胞生产异源性分泌性蛋白质的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：在装有微载体作为粘附细胞生长的固相支持物，和添加了微量元素的无血清细胞培养液的细胞生物反应器中，接种转化的CHO宿主细胞，以表达异源性分泌性蛋白质，其中通过在含血清细胞培养液中培养转化的CHO宿主细胞来制备该接种物；以粘附细胞形式培养接种的CHO宿主细胞，不灌注细胞培养液；开始通过连续灌注向细胞生物反应器提供添加有胰岛素、柠檬酸铁、硒和微量元素的无血清细胞培养液；在6～10天期间，提高添加有微量元素的无血清细胞培养液的进料流速，直到最终进料流速达到大约1～3.5体积/体积/天，以使CHO宿主细胞产生异源性蛋白质，并分泌到无血清细胞培养液中；和以最终进料流速培养粘附细胞形式的CHO宿主细胞。