利用特异性LNA引物检测基因突变

摘要：

本发明涉及一种检测不同核酸的方法，该核酸的核苷酸序列彼此在单一或多个位置的不同。本方法使用一组含有DNA单体和新颖种类的DNA类似物－锁定核酸(LNA)的嵌合寡核苷酸。LNA寡聚物遵循沃森－克里克碱基配对原则形成双显性组合，该双显性组合比DNA所形成的类似双显性组合更加稳定。其中在3’位置发现LNA核苷酸的含有“等位基因特异的”LNA寡核苷酸可利用酶仅在延长方向末端的核苷酸处延长，该核苷酸与待检测的核酸(一等位基因)的对应核苷酸互补。因此可区别不具序列示差杂交而具有标记寡核苷酸的等位基因。本发明进一步涉及进行该方法的试剂和该方法的应用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN00807543.3

申请日期：2000-03-17

公开/公告号：CN1361829

公开/公告日：2002-07-31

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:埃克西库恩公司

发明/设计人:J·斯科夫;M·芬格;M·H·雅格布森

主申请人地址:丹麦韦兹拜克

专利代理机构:北京纪凯知识产权代理有限公司

代理人:程伟%彭益群

国别省市代码:丹麦;DK

权利要求：

权利要求书1.一种检测样本中核酸Q’存在的方法，该核酸Q’的核苷酸序列与核酸Q在至少一个位置A不同，该方法包括下列步骤：a)将存在于样本中的核酸与适量的核苷三磷酸盐、用于核苷三磷酸盐聚合的试剂及至少一个诊断的寡核苷酸结合，该诊断的寡核苷酸在位置A含有核苷酸，该核苷酸在杂交条件下能与核酸Q’位置A的核苷酸杂交，但不与核酸Q位置A的核苷酸杂交，该至少一个诊断的寡核苷酸含有至少一个LNA，b)延长任何与样本中核酸杂交的寡核苷酸，以形成延长产物，其中该核酸用作模板，c)检测任何在步骤b)所形成的核酸并因此检测样本中核酸Q’的存在。