脱氧核糖核酸分子的通用捕集法
本发明涉及一种脱氧核糖核酸分子的通用捕集法,可应用于分子医学的疾病诊断。本方法包括预杂交、杂交、洗板、酶联、洗板、显色、光密度测定等步骤。利用接头液分子的特异性部分与病原体核酸分子的杂交及通用部分与共价键地固定在通用捕集孔上的通用捕集寡核苷酸分子杂交而应用于临床检测。该法与直接法相比较,具有杂交特异性强,杂交效率一致、灵敏度高、操作方便、能做定性定量及分型等多种检测、临检效率高、成本费用低等特点,适合日益增多的临检需要。
发明专利
CN00133662.2
2000-12-01
CN1309186
2001-08-22
C12Q1/68
黄道培
黄道培
201206上海市浦东新金桥路1998号
北京万科园专利事务所
张亚军%李丕达
上海;31
权利要求书1.一种脱氧核糖核酸分子的通用捕集法,其特征在于:包括下列操作步骤:A)预杂交:取12.5微升的1.6毫微克/微升接头分子液加入到盛有100微升杂交液的通用捕集孔中,37℃保温1小时,进行预杂交反应形成通用捕集杂交链,然后弃去孔中剩余液∶B)杂交:取100微升上述杂交液加入到上述孔中,取待测的生物样品40微升PCR反应液与40微升变性液的混合液25微升加到上述孔中,37℃保温1小时进行杂交链反应∶C)洗板:用洗涤液对孔中反应产物进行洗涤5次,每次用量300微升,然后弃去洗涤液;D)酶联:取50毫微克/毫升的酶联液100微升加入到上述孔中,37℃保温15分钟进行酶联反应;E)洗板:用洗涤液对孔中反应产物进行洗涤5次,每次用量300微升,然后弃去洗涤液;F)显色:孔中加入显色液100微升,25℃保持10分钟后加入停显液100微升;G)测定:上述样品移至在波长450毫微米的酶标仪上测定光密度数。