烟草为原料制备辅酶Q<sub>10</sub>的方法
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烟草为原料制备辅酶Q<sub>10</sub>的方法

引用
本发明是以烟草为材料,经过诱导、继代和悬浮培养,产生生长快、辅酶Q<sub>10</sub>含量高的烟草悬浮培养细胞。收集细胞加入丙酮研磨,过滤。滤液用石油醚萃取。萃取液浓缩后,经硅胶柱层析纯化,用乙醚-石油醚混合液浓度线性梯度洗脱,收集洗脱液。除去有机溶剂,加乙醇溶解。密封,结晶,离心收集辅酶Q<sub>10</sub>结晶。产率达500—510ug/g干细胞,回收率为57—59%,纯度达98%以上。此发明为辅酶Q<sub>10</sub>生产开拓了新途径,也为辅酶Q<sub>10</sub>药源国产化奠定了基础。

发明专利

CN00130816.5

2000-11-28

CN1298942

2001-06-13

C12N5/04

华南农业大学

徐凤彩;穆虹;高向阳;康起亮;叶国洪

510642广东省广州市天河区五山华南农业大学

华南理工大学专利事务所

伍宏达

广东;44

1.烟草为原料制造辅酶Q<subscript>10</subscript>的方法,其特征在于:(1)愈伤组织诱导:取烟草植体,洗净,70%乙醇溶液浸泡,再用0.1%氯化汞溶液消毒,无菌水冲洗除去浸泡液和消毒液,在无菌条件下,切成小块,接种于诱导培养基上,置16-32℃培养箱中黑暗培养至形成愈伤组织;(2)继代培养:将上述愈伤组织转入继代培养基中进行继代培养,产生疏松愈伤组织;(3)悬浮培养出种子细胞:将上述疏松愈伤组织,转入悬浮培养基中培养出种子细胞;(4)辅酶Q<subscript>10</subscript>提取:用丙酮作为抽提溶剂,将烟草悬浮培养细胞与丙酮按1∶2(质量/体积比)混合,研磨,过滤,残渣重复2次以上,合并滤液,用0.5倍滤液体积的石油谜(30-65)℃作萃取剂进行萃取,所得石油醚萃取液为辅酶Q<subscript>10</subscript>的石油醚提取液;(5)辅酶Q<subscript>10</subscript>分离纯化:将石油醚提取液用蒸发法浓缩至原体积的1/15,上硅胶柱用体积分数为4%的乙醚-石油醚浓度混合液线性梯度洗脱,收集黄色部分洗脱液,为辅酶Q<subscript>10</subscript>纯化液;(6)结晶:将纯化辅酶Q<subscript>10</subscript>溶液于60℃水浴上蒸发除去有机溶剂后,加入无机乙醇溶解,密封于4-8℃冰库中结晶,结晶完全后离心,收集结晶,即为辅酶Q<subscript>10</subscript>产品。
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2003-06-04授权
2007-01-24专利权的终止(未缴年费专利权终止)
2001-05-16实质审查的生效
2001-06-13公开
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