一种构建苏云金芽胞杆菌杀虫工程菌的方法

摘要：

本发明属于微生物杀虫农药技术领域，具体涉及一种构建苏云金芽胞杆菌杀虫工程菌的方法，其特点是，利用PCR技术从苏云金芽胞以色列亚种中克隆p19，p20两个辅助蛋白基因，通过基因工程方法构建具有特异毒力的工程菌，与已有技术相比，本发明提高了苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的表达量，促进了晶体的形成，提高了杀虫效率，降低了生产成本。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN00115955.0

申请日期：2000-08-15

公开/公告号：CN1337466

公开/公告日：2002-02-27

主分类号：C12N15/75

申请/专利权人:华中农业大学

发明/设计人:喻子牛;刘子铎;孙明;邵宗泽;徐世瑾;江昊;郑嵘

主申请人地址:430070湖北省武汉市洪山区狮子山街

专利代理机构:北京农林水专利代理有限公司

代理人:张红兵

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

权利要求书1、一种构建苏云金芽胞杆菌杀虫工程菌的方法，其过程包括PCR，其特征在于所述的步骤包括：1)从苏云金芽胞杆菌以色列亚种中克隆出p19、p20两个与野生型菌株的基因型一致的辅助蛋白基因；2)将辅助基因进行限制性内切酶酶切，并连接到适当的载体上，使辅助基因能够在苏云金芽胞杆菌中正常表达；3)将含p19、p20的穿梭质粒分别电转化入野生型菌株；4)通过质粒图谱、PCR、DNA-DNA杂交和聚丙烯酰氨凝胶电泳筛选、鉴定转化子；5)通过摇瓶培养、生物测定筛选发酵性能优良、毒力高的转化子。