牦牛血超氧化物歧化酶及其提取纯化工艺和应用
本发明涉及一种牦牛血超氧化物歧化酶及其提取纯化工艺和应用,所述的超氧化物歧化酶是将牦牛血经去血浆、洗涤、溶血、抽提去杂蛋白、分离、沉淀、透析、超滤浓缩后得到牦牛血SOD;本发明的酶总活力高达90万单位/l,平均酶比活为13000u/mg,本发明的工艺可减少SOD的酶总活损失,得率高、生产周期短、使用试剂省、操作简单;本发明可作药品、保健品和食品、化妆品添加剂用。
发明专利
CN00113802.2
2000-04-28
CN1321743
2001-11-14
C12N9/08
苏普
苏普
730050甘肃省兰州市小西湖硷沟沿211号
中国科学院兰州专利事务所
王玉双
甘肃;62
权利要求书1、一种牦牛血超氧化物歧化酶,其特征在于它由下述方法制备获得:①将牦牛血去除血浆得红血球,用红血球的2-4倍体积的盐液清洗红血球2-6次,再往红血球内加入0.5-1.5倍的水,搅拌使其溶血;②将溶血液冷却至4-4℃,加入溶血液体积的0.15-0.35倍、温度为至少-10℃、浓度为90-98%的醇和溶血液体积的0.1-0.2倍、浓度为90-98%的氯仿,混合后再稀释去除杂蛋白得蛋黄色上清液;③将醇相上清液升温至室温再加入体积比为1∶(0.5-1.5)的固体磷酸氢二钾;分离得淡蓝色上清液;④将③步最后的上清液冷却至至少0℃,再加入上清液体积的0.5-1倍、温度为至少-10℃的丙酮,然后得到沉淀物,用水溶解沉淀物,将溶解液置于透析袋中相对于2.5mm、PH7.6的KH2PO4-K2HPO4的缓冲液透析,离心透析液得淡绿色清液,⑤将淡绿色清液进行超滤即得超氧化物歧化酶。