非同位素聚合酶链式反应－单链构象多态性检测基因突变的方法

摘要：

本发明公开了一种非同位素聚合酶链式反应－单链构象多态性检测基因突变的方法，是将传统方法中采用的经高温或加碱进行变性处理改为采用离子键极性很强的SDS变性剂与上样缓冲液在90～100℃进行变性处理3～5分钟，实现无论片段大或小，均能获得区带清晰、灵敏度更高、重现性好的实验结果。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN00113518.X

申请日期：2000-06-30

公开/公告号：CN1288958

公开/公告日：2001-03-28

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:湖南医科大学

发明/设计人:朱敏;谭文斌;周钢;谢慎思

主申请人地址:410078湖南省长沙市开福区湘雅路88号湖南医科大学分子生物学研究中心

专利代理机构:湖南兆弘专利事务所

代理人:赵洪%赵静华

国别省市代码:湖南;43

权利要求：

权　　利　　要　　求　　书1、一种非同位素聚合酶链式反应-单链构象多态性制检测基因突变的方法，包括以下步骤：(1)按常规方法提取DNA；(2)PCR扩增待检DNA；(3)变性处理；(4)聚丙烯酰胺凝胶电泳；(5)银染法显示SSCP分析区带；其特征在于采用的变性方法为：按PCR产物：变性剂(内含0．01～3％、SDS、10～50mM EDTA)：上样缓冲液(内含95％甲酰胺、0．1％二甲苯青、0．1％溴酚蓝、10mM EDTA)=1∶1∶1(体积比)条件下，在90～100℃进行变性处理3～5分钟。