携带Paenibacillus polymyxa WLY78固氮基因簇(nif)的重组大肠杆菌Escherichia coli78-7转录组分析 Genome-wide transcriptional analysis of the recombinant Escherichia coli 78-7 carrying a nif gene operon of Paenibacillus polymyxa WLY78
[目的]来自Paenibacillus polymyxa WLY78的固氮基因簇(nifBHDKEfNXhesAnifV)可以转化入Escherichia coli中表达并使重组大肠杆菌合成有固氮活性的固氮酶.本文拟通过对重组大肠杆菌E.coli 78-7的转录组分析以提高其固氮能力.[方法]对固氮条件(无氧无NH4+)和非固氮条件(空气和100 mmol/LNH4+)培养的重组大肠杆菌E.coli 78-7进行转录组分析.[结果]nif基因在两种培养条件下显著表达,说明在重组大肠杆菌中可规避原菌中氧气和NH4+对nif基因的负调控.对于固氮过程必需的非nif基因,如参与钼、硫、铁元素转运的mod、cys和feoAB,这些基因在两种培养条件下表达水平有差异.而参与铁硫簇合成的suf和isc基因簇在两条件下表达水平差异巨大.此外,参与氮代谢的基因在固氮条件下显著上调.[结论]重组大肠杆菌中与固氮相关的非nif基因在该菌的固氮过程中具有较大影响,本文对在异源宿主中调高固氮酶活性研究具有重要意义.