LEF1-AS1靶向miR-339-5p对MPP+诱导的SK-N-SH损伤的影响

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA)LEF1反义RNA1(LEF1 anti-sense RNA 1,LEF1-AS1)是否通过靶向微小RNA-339-5p(MicroRNA-339-5p,miR-339-5p)来影响1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞损伤.方法 定量逆转录聚合酶链反应(Quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测LEF1-AS1和miR-339-5p在帕金森病患者中的表达水平;将SK-N-SH细胞分为con(对照)组、MPP+组(0.3 mmol/L MPP+)、MPP++小干扰RNA对照(Small interfering RNA-NC,si-NC)组(MPP+处理前转染si-NC)、MPP++si-LEF1-AS1组(MPP+处理前转染si-LEF1-AS1)、MPP++微小RNA对照(MicroRNA-NC,miR-NC)组(MPP+处理前转染miR-NC)、MPP++miR-339-5p组(MPP+处理前转染miR-339-5p)、MPP++si-LEF1-AS1+抗微小RNA对照(anti-MicroRNA-NC,anti-miR-NC)组(MPP+处理前共转染si-LEF1-AS1和anti-miR-NC)、MPP++si-LEF1-AS1+anti-miR-339-5p组(MPP+处理前共转染si-LEF1-AS1和anti-miR-339-5p);运用噻唑基蓝四唑溴化物(Thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法、比色法、流式细胞仪和Western Blotting检测细胞活力、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平、超氧化物歧化酶(Superoxide dis-mutase,SOD)活性、细胞凋亡和B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、Bcl-2蛋白表达水平;荧光素酶测定分析LEF1-AS1和miR-339-5p之间的靶向结合.结果 与正常人比较,帕金森病患者中LEF1-AS1表达水平升高,miR-339-5p表达水平降低(P<0.05);MPP+诱导SK-N-SH细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平、LEF1-AS1表达水平和MDA水平增高,Bcl-2蛋白表达水平、细胞活性(48、72 h)、miR-339-5p表达水平、SOD活性降低(P<0.05);干扰LEF1-AS1或过表达miR-339-5p后MPP+诱导的SK-N-SH细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平、MDA水平降低,Bcl-2蛋白表达水平、细胞活性(48、72 h)、miR-339-5p表达水平和SOD活性升高(P<0.05);LEF1-AS1靶向调控miR-339-5p的表达;抑制miR-339-5p可逆转干扰LEF1-AS1对MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤和氧化应激的影响.结论 干扰LEF1-AS1通过靶向miR-339-5p来减轻MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤.

关键词：帕金森病;LEF1反义RNA1;微小RNA339-5p;氧化应激;凋亡

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分类号：R742.5(神经病学与精神病学)

资助基金：2020年沧州市科技计划自筹经费项目NO.204106101

在线出版日期：2021-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：487-493,512