黄芩苷通过上调lncRNA H19表达来减轻MPP+诱导的PC12细胞神经毒性

摘要：

目的 探讨黄芩苷是否通过上调长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)H19表达来减轻1-甲基4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,M PP+)诱导的PC12细胞神经毒性.方法 分别采用0.5、0.75、1、2 mmol/L M PP+和10、20、50和70μmol/L黄芩苷作用PC12细胞,后续试验使用水平分别选择0.75 mmol/L M PP+和50μmol/L黄芩苷;以0.75 mmol/L M PP+损伤PC12细胞,体外模拟帕金森病,并加入黄芩苷;采用四甲基偶氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)进行细胞活力测定,Annexin V-异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate isomer,FITC)/碘化丙啶(Propidium iodide,PI)双染法进行凋亡定量分析,蛋白质印迹分析(Western blot)检测Pro-天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3,Cleaved-caspase-3,B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的相对表达水平,实时定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)进行lncRNA H19的相对表达水平检测;在PC12细胞中转染ln-cRNA H19小干扰RNA(lncRNA H19 siRNA,si-H19),并加入MPP+和黄芩苷,考察PC12细胞增殖、凋亡等变化.结果 与对照组比较,MPP+降低PC12细胞的存活率、Bcl-2蛋白、lncRNA H19相对表达水平,提高PC12细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3,Bax蛋白相对表达水平(P<0.05),而Pro-caspase-3蛋白相对表达水平无明显变化(P>0.05).与MPP+组比较,黄芩苷显著提高MPP+诱导的PC12细胞的存活率、Bcl-2蛋白、lncRNA H19相对表达水平,降低PC12细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3,Bax蛋白相对表达水平(P<0.05),而Pro-caspase-3蛋白相对表达水平无明显变化(P>0.05).转染si-H19后黄芩苷和MPP+诱导的PC12细胞的存活率、Bcl-2蛋白相对表达水平降低,PC12细胞的凋亡率、Cleaved-caspase-3,Bax蛋白相对表达水平升高(P<0.05),而Pro-caspase-3蛋白相对表达水平无明显变化(P>0.05).结论 黄芩苷上调ln-cRNA H19表达,提高MPP+诱导的PC12细胞活力和降低其凋亡,减轻MPP+诱导的PC12细胞神经毒性.

关键词：黄芩苷;lncRNA H19;MPP+;PC12细胞;存活;凋亡

所属期刊栏目：28

分类号：R742.5(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2021-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：371-377