Ankfy1参与遗传性共济失调的发病机制及其对自噬的影响

摘要：

目的 探讨Ankfy1(Ankyrin repeat and FYVE domain containing 1,Ankfy1)基因敲低或过表达后对细胞自噬影响,体外实验研究Ankfy1基因突变参与遗传性共济失调的发病机制.方法 培养人恶性脑胶质瘤细胞系(U87)细胞,建立Ankfy1基因敲低和过表达的细胞模型,运用电镜扫描观察细胞内的自噬小体;运用Western blot方法检测自噬相关蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine/threonine-protein kinase,ULK1)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Phosphorylation serine/threonine-protein kinase,pULK1)、泛素结合蛋白p62(Sequestosome 1,p62)、微管相关蛋白LC3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3 alpha,LC3)、溶酶体相关膜蛋白1(Lysosomal associated membrane protein 1,Lamp1)和溶酶体相关膜蛋白2(Lyso-somal associated membrane protein 2,Lamp2)的水平.结果 扫描电镜观察发现Ankfy1敲低组和Ankfy1过表达组未见完整的自噬小体,但可见形态不规则的自噬溶酶体;对照组可见丰富的自噬小体.敲低组和过表达组的自噬相关蛋白的ULK1,pULK1,LC3,Lamp1和Lamp2的表达水平均较对照组高,p62的表达水平均较对照组低.当Ankfy1基因上调或者下调时会对细胞环境造成应激状态,诱导自噬发生,引起自噬通量的增加,但自噬溶酶体形态异常、自噬溶酶体通路受损.结论 Ankfy1基因的上调或者下调会导致细胞自噬溶酶体通路异常,这也许是遗传性共济失调发病的机制之一.

关键词：Ankfy1、共济失调、发病机制、自噬

所属期刊栏目：28

分类号：R741.041(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金;中央高校基本科研业务费专项武汉大学项目

在线出版日期：2021-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：263-267