褐藻寡糖对创面的生物学效应:裂解程度依赖性

摘要：

目的 探索不同裂解程度的褐藻寡糖对创面细胞和组织的生物学作用.方法 采用不同孔隙的透析袋将褐藻寡糖分为分子量分别为<500、500～1000、1000～5000、5000～10000、10000～20000的5个组,通过分子量区分裂解程度,分别命名为实验组1～5.采用0.02％浓度前述褐藻寡糖与人角质形成细胞(Hum an keratinocytes,HaCat)、巨噬细胞共培养24 h,以正常培养的细胞为对照组,评估各组细胞增殖能力,免疫荧光检测Caspase 3评估细胞凋亡情况,活性氧类(ROS)试剂盒检测评估氧化应激情况.与巨噬细胞共培养24 h,ELISA检测IL-1β、IL-10、TNF-α,评估各组炎症因子释放情况,通过透射电镜观察细胞胞吞能力.通过微量肉汤法检测各组褐藻寡糖对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC).建立SD大鼠背部全层皮肤缺损创面模型,海藻酸钠溶液换药为阳性对照组,生理盐水换药为阴性对照组,0.02％浓度前述褐藻寡糖换药作为实验组,第6天和第12天观察创面愈合情况,取创面组织行HE染色观察组织学变化,并检测炎症因子、细胞凋亡和氧化应激情况.结果 当褐藻寡糖分子量<500、500～1000时,细胞实验和动物实验(第6天)均提示其能有效促进细胞增殖和IL-10分泌,减少IL-1β、TNF-α分泌和细胞凋亡,相较于阴性对照组其可促进创面愈合,且当分子量<500时效果更明显,但促愈合效果弱于阳性对照组(P<0.05).褐藻寡糖分子量>1000时,细胞实验提示前述作用均未与对照组出现明显差异(P>0.05),动物实验中当分子量处于5000～10000、10000～20000时创面愈合率增高(P<0.05),与阳性对照组相比,创面愈合率无明显差异(P>0.05),实验中观察到其在创面形成了薄膜结构,但其余指标无明显改变(P>0.05).透射电镜未能观察到细胞吞噬能力增强表现.MIC和MBC检测各分子量褐藻寡糖在5％浓度下仍未能具有抑菌或杀菌作用.结论 褐藻寡糖的生物学作用与分子量(裂解程度)严格相关,较低分子量的褐藻寡糖具有改善炎症因子分泌、促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、改善氧化应激程度的作用,该作用并不依赖于褐藻寡糖是否进入细胞内;较高分子量的褐藻寡糖不具有明显的生物学作用,但具有成膜作用,间接促进创面愈合.但无论何种分子量的褐藻寡糖,均不具有抗菌作用.

关键词：褐藻寡糖、分子量、炎症反应、氧化应激、凋亡

所属期刊栏目：19

分类号：R318.08(医用一般科学)

在线出版日期：2023-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1-9