肝脏脱细胞基质微颗粒促进HepG2细胞球状体形成与肝相关功能分化的研究

摘要：

目的 探索肝脏脱细胞基质(dECM)微颗粒对3D培养HepG2细胞的肝相关功能状态的影响.方法 通过肝脏门静脉灌流脱细胞液等成分,制得肝脏dECM.用组织学特殊染色、扫描电镜及免疫组织化学等方法鉴定脱细胞效果以及dECM成分.通过液氮冷冻研磨将dECM制备成微颗粒,通过差速离心分离不同粒径范围的微颗粒.利用超低吸附培养板进行HepG2细胞球状体3D培养,向培养基中加入dECM微颗粒,观察其对HepG2细胞球状体的形成及其肝相关功能状态的影响.利用ELISA、PCR检测相关蛋白的分泌和基因表达.结果 制得的dECM无细胞结构,保留了细胞外基质的相关成分.在液氮研磨与差速离心分离后,可获得粒径在微米级的dECM微颗粒.dECM微颗粒可以促进HepG2细胞形成更致密的球状体;加入dECM微颗粒的HepG2球状体,细胞分泌白蛋白和尿素氮的水平增加(P<0.05);PCR结果表明,加入dECM微颗粒后,细胞的肝功能相关基因的表达水平显著提升(P<0.05).结论 肝脏脱细胞基质微颗粒可以促进HepG2细胞球状体的形成和HepG2细胞球状体的肝相关功能分化.

关键词：细胞外基质;HepG2细胞;细胞球状体;组织工程;3D培养

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分类号：R318.1(医用一般科学)

资助基金：国家重点研发计划;国家自然科学基金面上项目

在线出版日期：2021-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：283-289,326