家兔作为胎龄期骨髓间充质干细胞动物模型的实验研究

摘要：

目的：建立以家兔为对象的胎龄期BMSC研究动物模型。方法通过人工授精方法，获得孕期3周的孕兔4只，行剖腹产术取出胎兔20只，冲取胎兔骨髓，以贴壁培养法进行体外扩增培养。测量第3代胎兔BMSC的生长曲线，克隆形成率，并进行成骨、成脂及成软骨诱导分化。另外，将原代细胞冻存30 d后复苏，测量其第3代生长曲线，对冻存前后增殖能力的变化进行观察。扫描电镜观察胎兔BMSC与β-TCP形成细胞材料复合物的体外形态。将BMSCs-β-TCP复合物植入裸鼠皮下，于术后1、3、6个月分别取材，行HE、VG、Masson染色观察。结果胎兔来源的BMSC于倒置相差显微镜下观察，细胞饱满均匀，呈梭形或倒三角形状；传代后各代细胞形态未发生明显变化，生长曲线相差不大；成骨、成脂以及成软骨诱导观察到钙结节、脂肪空泡、黏多糖。冻存30 d后复苏，其第3代生长曲线与冻存前相比未见明显变化。电镜下观察，与β-TCP复合7 d后，细胞能均匀紧密贴合于材料上，伸展良好分布均匀。植入裸鼠皮不同时间点取材行HE、VG、Masson染色，均显示有新生骨组织生成。结论以家兔为研究动物模型，可以在胎龄期获取并分离得到BMSC，并可在异位构建组织工程骨，是间充质干细胞动物研究的新选择。

关键词：骨髓间充质干细胞、种子细胞、骨组织工程、家兔

分类号：Q813.1+1(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2015-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：99-103