健脾益肾化浊方对多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢颗粒细胞凋亡蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路的影响

摘要：

目的 探讨健脾益肾化浊方治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的可能作用机制.方法 70只SD雌性大鼠随机分为空白组和模型组各15只,二甲双胍组,健脾益肾化浊方低、中、高剂量组各10只.除空白组外,其余各组均采用来曲唑灌胃联合高脂饲料喂养21天构建PCOS模型.造模成功后,空白组和模型组用10ml/(kg·d)生理盐水灌胃;二甲双胍组用盐酸二甲双胍片100 mg/(kg·d)灌胃;健脾益肾化浊方低、中、高剂量组分别用健脾益肾化浊方药物混悬液1.275、2.55、5.10 g/(kg·d)灌胃,干预30天.将卵巢称重并计算卵巢指数;ELISA法测定大鼠血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、抗苗勒管激素(AMH)和雌二醇(E2)水平;HE染色观察卵巢组织形态改变;免疫组织化学染色法检测大鼠卵巢组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸酶9(Caspase-9)和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋(mTOR)蛋白阳性表达;Western blot法检测大鼠卵巢组织促凋亡蛋白(BAX)、抗凋亡蛋白(Bcl-2)、Caspase-9、细胞色素 C(Cytochrome-C)和 PI3K、AKT、mTOR 蛋白相对表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织以囊性扩张卵泡为主,颗粒细胞层减少,间质增生明显;卵巢指数、血清 T、LH、AMH、卵巢组织 Caspase-3、Caspase-9 平均光密度和 BAX/Bcl-2值、Cytochrome-C、Caspase-9蛋白相对表达量明显升高,血清E2、FSH及卵巢组织PI3K、AKT、mTOR平均光密度和蛋白表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,健脾益肾化浊方各剂量组和二甲双胍组卵巢组织多囊样改变得到改善,可见各级卵泡和黄体,颗粒细胞层增厚,卵巢指数、血清LH、AMH、卵巢组织Caspase-9平均光密度和蛋白相对表达明显降低,血清E2、FSH,卵巢组织PI3K和AKT平均光密度,PI3K、AKT和mTOR蛋白相对表达显著升高(P＜0.05或P＜0.01);二甲双胍组和健脾益肾化浊方中、高剂量组血清T水平和Caspase-3平均光密度显著下降,健脾益肾化浊方低、高剂量组和二甲双胍组mTOR平均光密度显著增加、BAX/Bcl-2值明显降低,二甲双胍组和健脾益肾化浊方高剂量组卵巢组织Cytochrome-C蛋白表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01).与二甲双胍组相比,健脾益肾化浊方低剂量组血清T水平明显升高,健脾益肾化浊方中剂量组BAX/Bcl-2值显著升高(P＜0.05);与健脾益肾化浊方中剂量组相比,健脾益肾化浊方高剂量组Cytochrome-C蛋白表达显著降低(P＜0.05).结论 健脾益肾化浊方可抑制PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡蛋白表达,从而维持内分泌平衡以改善卵巢生殖功能,其机制可能与激活PI3K/AKT/mTOR信号通路有关.

关键词：多囊卵巢综合征、健脾益肾化浊方、颗粒细胞、细胞凋亡、PI3K/AKT/mTOR信号通路

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分类号：R-33;R734.2;R329.25

资助基金：国家自然科学基金;宁夏自然科学基金项目;宁夏自然科学基金项目;宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室/宁夏区域高发病中西医结合防治研究重点实验室开放课题

在线出版日期：2023-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1585-1592