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10.13288/j.11-2166/r.2022.13.015

疏肝健脾活血方对肝纤维化模型小鼠肝组织CUG结合蛋白1表达及TGF-β1/Smads信号通路的影响

引用
目的 探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制.方法 48只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、疏肝健脾活血方组、CUGBP1敲减组,每组12只.CUGBP1敲减组一次性尾静脉注射CUGBP1敲减腺相关病毒,其余各组尾静脉注射对照腺相关病毒,每只小鼠注射量为100μl,病毒滴度不少于1×1012vg/ml.4周后,除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20%四氯化碳(CC14)2.5 ml/kg,每3天注射1次,连续4周,诱导肝纤维化模型;同时疏肝健脾活血方组小鼠予33.3g/(kg-d)疏肝健脾活血方药液灌胃,正常组、模型组及CUGBP1敲减组予10ml/kg蒸馏水灌胃,每天1次,连续4周.末次给药12 h后取材,采用HE染色、Masson染色、天狼星红染色进行肝脏病理学观察;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及肝组织中羟脯氨酸(HYP)含量;检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α平滑肌激动蛋白(α-SMA)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad7、CUG结合蛋白1(CUGBP1)蛋白表达,肝组织中转化生长因子 β1(TGF-β1)、Collagen Ⅰ、α-SMA、Smad7、CUGBP1 mRNA表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠肝组织病理显示肝细胞排列紊乱,有大量炎性细胞浸润与大量胶原纤维沉积,并且形成明显的纤维间隔;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量上升,肝组织中Collagen Ⅰ、CUGBP1、p-Smad2、p-Smad3、α-SMA 蛋白表达升高,TGF-β1、Collagen Ⅰ、CUGBP1、α-SMA mRNA 表达升高,Smad7蛋白及mRNA表达下降(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,疏肝健脾活血方组和CUGBP1敲减组小鼠肝组织病理显示有少量炎性细胞浸润,纤维组织增生不明显,纤维间隔稀疏;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量下降,上述蛋白及mRNA水平均有所改善(P<0.05或P<0.01).与疏肝健脾活血方组比较,除Smad7mRNA表达升高外,CUGBP1敲减组其余各指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论 疏肝健脾活血方可能通过抑制肝组织CUGBP1表达,从而阻断TGF-β1/Smads信号后续转导,进而抑制肝纤维化进展.

肝纤维化、疏肝健脾活血方、CUG结合蛋白1、TGF-β1/Smads信号通路

63

R587.2;R711.2;R285.5

国家自然科学基金81973736

2022-07-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

1276-1282

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