附子、甘草有效成分不同配伍比例对H9c2心肌细胞缺氧缺糖损伤的影响

摘要：

目的 研究附子有效成分次乌头碱和甘草有效成分甘草次酸不同比例配伍对H9c2心肌细胞缺氧缺糖损伤的影响及可能作用机制.方法 取长成致密单层的H9c2心肌细胞分成正常组、模型组、地高辛组(80 μmol/L)、次乌头碱组(120 μmol/L)及1∶0.5组、1∶1组、1∶2组(次乌头碱为120 μmol/L,甘草次酸分别为60、120、240μmol/L),每组6个复孔.正常组加入完全培养基1 ml,模型组加入无糖Earle's液1 ml,地高辛组、次乌头碱组和各配伍组分别加相应药时用无糖Earle's液稀释成相应浓度,加入1ml,除正常组外其余各组加药后构建缺氧缺糖模型培养4h.观察各组H9c2心肌细胞的形态学变化,检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β),肌酸肌酶(CK)的含量及Caspase-3、Fas-L、Fas蛋白表达. 结果 正常组心肌细胞呈贴壁生长,多为梭形,形成不规则的星形,并形成呈放射状排列的细胞簇;模型组心肌细胞胞体折光性下降,胞浆皱缩,可见折光性强的脱壁死亡细胞;各配伍组的细胞形态较模型组均有明显改善,并以配伍组1∶1组最明显.与正常组比较,模型组TNF-α、IL-1β、CK含量及Caspase-3、Fas-L、Fas的蛋白表达均升高(P＜0.01).与模型组比较,次乌头碱组各组指标均无明显改变(P＞0.05);而地高辛组和各配伍组不同程度降低TNF-α、IL-1 β、CK含量及Caspase-3、Fas-L、Fas蛋白表达,并且以1:1组效果最好(P＜0.05或P＜0.01). 结论 次乌头碱配伍甘草次酸对心肌细胞缺氧缺糖损伤有保护作用,并以1:1配伍最佳,其作用机制可能与抗炎及抑制细胞凋亡有关.

关键词：附子、甘草、次乌头碱、甘草次酸、药物配伍、缺氧缺糖、炎症因子、细胞凋亡

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资助基金：国家自然科学基金81473412;浙江省中医药中西医结合重点学科2012-XK-A06;浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目

在线出版日期：2016-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1327-1331