10.3969/j.issn.1001-6015.2023.06.003
小鼠膝骨关节炎阳虚血瘀证模型的构建与评价
目的:探讨构建小鼠膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)阳虚血瘀证模型的有效方法.方法:将12只10周龄雄性无特定病原C57BL/6J小鼠采用内侧半月板失稳(destabilized medial meniscus,DMM)法构建KOA模型.KOA造模成功后,将12只KOA模型小鼠随机分为KOA阳虚血瘀证组和KOA对照组,每组6只.KOA阳虚血瘀证组小鼠于浸在冰水混合物中的塑料鼠箱中饲养,并以冰水混合物为饮用水;KOA对照组小鼠于22℃ 干燥环境中正常饲养.饲养10周后,评价小鼠阳虚血瘀证表现,分析小鼠步态,处死小鼠后进行小鼠膝关节Micro-CT分析、膝关节组织病理学观察及膝关节软骨Ⅱ型胶原蛋白α1链表达检测.结果:①小鼠阳虚血瘀证评价结果.KOA阳虚血瘀证组小鼠的阳虚证评分和血瘀证评分均高于KOA对照组[(13.33±1.37)分,(3.50±1.23)分,t=13.120,P=0.000;(4.83±0.75)分,(0.83±0.75)分,t=9.200,P=0.000].②小鼠步态分析结果.2 组各收集到5只小鼠完整的步态分析数据.KOA阳虚血瘀证组小鼠右后肢的爪面积和步幅均小于KOA对照组[(0.610± 0.094)cm2,(0.758±0.042)cm2,t=-3.211,P=0.012;(1.780±0.045)cm,(2.040±0.152)cm,t=-3.677,P=0.006];2 组小鼠右后肢的摆动期时间和站立期时间比较,组间差异均无统计学意义[(0.060±0.004)s,(0.060±0.009)s,t=-0.096,P=0.963;(0.062±0.009)s,(0.076±0.014)s,t=-1.810,P=0.137].③小鼠膝关节 Micro-CT 分析结果.KOA 阳虚血瘀证组小鼠的骨体积分数低于KOA对照组[(55.582±2.810)%,(69.248±1.884)%,t=-6.997,P=0.002],骨小梁分离度大于KOA对照组[(0.114±0.009)mm,(0.077±0.010)mm,t=4.883,P=0.008];2组小鼠的骨小梁厚度、骨小梁数量比较,组间差异均无统计学意义[(0.148±0.005)mm,(0.210±0.036)mm,t=-2.939,P=0.094;(3.767±0.100)个·mm-1,(3.368±0.547)个·mm-1,t=1.243,P=0.282].④小鼠膝关节组织病理学观察结果.2组小鼠膝关节软骨均有缺失,且KOA阳虚血瘀证组小鼠膝关节软骨缺失较KOA对照组更严重.⑤小鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原蛋白α1链表达检测结果.KOA阳虚血瘀证组小鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原蛋白α1链阳性表达面积比和平均光密度均低于KOA对照组[(0.144±0.003)%,(0.163±0.003)%,t=-6.580,P=0.003;(0.051±0.002)lux,(0.095±0.004)lux,t=-15.878,P=0.001].结论:DMM法联合低温诱导法是构建小鼠KOA阳虚血瘀证模型的有效方法.
骨关节炎、膝、小鼠、疾病模型、动物、阳虚血瘀、动物实验
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R684.3;Q954-33;S852.61
国家自然科学基金;浙江中医药大学基本科研能力提升项目
2023-07-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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