桃红四物汤对兔自体皮片移植模型 Delta-like 4表达的影响
目的：观察桃红四物汤对兔自体皮片移植模型 Delta-like 4表达的影响。方法：将75只新西兰大白兔（10～12月龄）随机分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组15只。模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组动物进行自体皮片移植手术，假手术组仅在对应区域作切口，不进行皮下组织分离。造模术后假手术组和模型组动物以蒸馏水灌胃，低剂量组、中剂量组和高剂量组均以制备好的桃红四物汤汤剂灌胃（每次给药量分别为2．5 g·kg －1、5 g·kg －1、10 g·kg －1），每天2次。分别在药物干预开始后2、5、8 d 从每组随机选取5只动物，心脏采血后处死，切取移植皮片吻合区皮片组织。采用酶联免疫吸附实验测定血清 Delta-like 4蛋白含量；所取皮片组织分成2份，一份制成石蜡切片，HE 染色后测定血管密度，另一份采用逆转录聚合酶链式反应法测定 Delta-like 4 mRNA 含量。结果：①血清 Delta-like 4蛋白含量。药物干预开始后2 d，5组动物血清 Delta-like 4蛋白含量比较，差异无统计学意义[（30．58±3．56）ng·mL －1，（32．31±2．66）ng·mL －1，（33．53±1．75）ng·mL －1，（36．00±1．49） ng·mL －1，（35．63±1．87）ng·mL －1，F ＝2．669，P ＝0．062]。药物干预开始后5、8 d，5组动物血清 Delta-like 4蛋白含量比较，组间差异均有统计学意义[（30．56±1．35）ng·mL －1，（33．52±2．50）ng·mL －1，（37．96±1．83）ng·mL －1，（48．74±2．34）ng·mL －1，（49．05±2．86）ng·mL －1，F ＝46．239，P ＝0．000；（29．26±2．20）ng·mL －1，（32．98±1．43）ng·mL －1，（35．24±1．97）ng·mL －1，（38．02±1．72）ng·mL －1，（36．06±2．50）ng·mL －1，F ＝8．394，P ＝0．000]；模型组分别与假手术组和低剂量组比较，差异均无统计学意义（5 d：P ＝0．112，P ＝0．269；8 d：P ＝0．340，P ＝0．182）；中、高剂量组血清 Delta-like 4蛋白含量均高于模型组（5 d：P ＝0．000，P ＝0．000；8 d：P ＝0．020，P ＝0．006）；中、高剂量组比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．862，P ＝0．245）。药物干预后5 d，中、高剂量组血清 Delta-like 4蛋白含量均高于低剂量组（P ＝0．000，P ＝0．000）。药物干预开始后8 d，中、高剂量组 Delta-like 4蛋白含量与低剂量组比较，差异均无统计学意义（P ＝0．105，P ＝0．623）。②移植皮片组织中 Delta-like 4 mRNA 含量。药物干预开始后2、5、8 d，5组动物移植皮片中 Delta-like 4 mRNA 含量比较，组间差异均有统计学意义（0．26±0．03，0．29±0．04，0．34±0．06，0．42±0．03，0．39±0．04，F ＝7．072，P ＝0．001；0．25±0．03，0．34±0．04，0．39±0．03，0．48±0．06，0．45±0．06，F ＝12．028， P ＝0．001；0．25±0．06，0．30±0．04，0．35±0．03，0．44±0．03，0．43±0．04，F ＝10．813，P ＝0．000）；模型组分别与假手术组和低剂量组比较，差异均无统计学意义（2 d：P ＝0．452，P ＝0．162；5 d：P ＝0．320，P ＝0．158；8 d：P ＝0．171，P ＝0．219）；模型组 Delta-like 4 mRNA 含量低于中、高剂量组（2 d：P ＝0．000，P ＝0．001；5 d：P ＝0．001，P ＝0．009；8 d：P ＝0．001，P ＝0．002）；中、高剂量组比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．426，P ＝0．330，P ＝0．725）。药物干预开始后2 d，中、高剂量组与低剂量组比较，差异均无统计学意义（P ＝0．111，P ＝0．167）；药物干预开始后5、8 d，中、高剂量组 Delta-like 4 mRNA 含量均高于低剂量组（5 d：P ＝0．024，P ＝0．025；8 d：P ＝0．013，P ＝0．028）。③移植皮片组织中血管密度。药物干预开始后2、5 d，5组动物移植皮片中每个视野（×400）中血管数量比较，组间差异均有统计学意义[（5．37±0．36）个，（2．55±0．41）个，（2．83±0．24）个，（3．31±0．26）个，（3．53±0．67）个，F ＝4．084，P ＝0．014；（5．62±0．56）个，（4．25±0．68）个，（4．80±0．74）个，（5．88±0．42）个，（5．92±0．48）个，F ＝4．600，P ＝0．009]；模型组均低于假手术组（P ＝0．001，P ＝0．011），模型组与低剂量组比较，差异均无统计学意义（P ＝0．527，P ＝0．268）；中、高剂量组比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．620，P ＝0．939）。药物干预开始后2 d，中、高剂量组与模型组比较，差异均无统计学意义（P ＝0．102，P ＝0．131）；中、高剂量组与低剂量组比较，差异均无统计学意义（P ＝0．297，P ＝0．352）。药物干预开始后5 d，中、高剂量组高于模型组（P ＝0．003，P ＝0．003）；中、高剂量组与低剂量组比较，差异均无统计学意义（P ＝0．038， P ＝0．033）。药物干预开始后8 d，5组动物移植皮片中每个视野中血管数量比较，差异无统计学意义[（6．18±0．33）个，（5．86±0．66）个，（6．03±0．40）个，（6．27±0．53）个，（6．27±0．59）个，F ＝0．334，P ＝0．852]。结论：桃红四物汤能上调兔自体皮片移植模型 Delta-like 4的表达，促进血管新生。但本研究未能明确桃红四物汤的剂量及作用时间与其上调 Delta-like 4表达作用的关系，需要在今后的研究中进一步探讨。
桃红四物汤、皮肤移植、Notch 信号通路、兔、动物实验
R61;R64
国家自然科学基金项目81373658
2015-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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