维生素A缺乏导致新生大鼠枕颈部畸形的机制研究
目的:探讨维生素 A 缺乏导致新生大鼠枕颈部畸形的作用机制。方法:将40只5周龄雌性健康 SPF 级 SD 大鼠随机分为2组,正常对照组20只,维生素 A 缺乏组20只;20只适龄雄性健康 SPF 级 SD 大鼠分笼饲养。正常对照组饲以 AIN -93M饲料,维生素 A 缺乏组饲以缺乏维生素 A 的 AIN -93M饲料,雄性大鼠饲以 AIN -93M饲料。饲养至第10周从雌性大鼠的目外眦取血,采用酶联免疫吸附法检测2组雌鼠血清维生素 A 含量,鉴定大鼠模型。造模成功后,将大鼠按雌2雄1的比例合笼交配,第2天清晨检查阴栓,有阴栓者记为 E0 d。于妊娠 E11.5 d 取2组半数的孕鼠,麻醉处死后剖腹,每只孕鼠取出2只胚胎,剥离被膜,置于液氮中,然后转移至-80℃的冰箱里保存待测。于妊娠 E21 d 取新生鼠,麻醉处死后剥离皮肤筋膜以及内脏,置于95%的酒精中固定待测。采用 RT -qPCR 方法检测胚胎 Hoxd3基因 mRNA 表达情况;采用双色染色法制作大鼠骨骼标本,观察新生鼠枕颈部骨骼发育情况。结果:①雌鼠血清维生素 A 含量。维生素 A 缺乏组大鼠血清维生素 A 含量明显低于正常对照组[(214±39)ng·mL -1,(432±54)ng·mL -1,t =14.636,P =0.000]。②胚胎 Hoxd3基因 mRNA 的表达量。维生素 A 缺乏组胚胎 Hoxd3基因表达量低于正常对照组(0.58±0.11,1.03±0.14,t =10.407,P =0.000)。③新生鼠枕颈部骨骼形态。正常对照组可见枕骨与寰枢椎发育正常,对位关系良好;维生素 A 缺乏组可见寰椎后弓与枕骨大孔后缘角度增大,寰枢椎对位关系异常,寰枢椎后弓角度增大,C2~C7椎弓及棘突高度降低、宽度变窄,且相邻椎体间隙增大。结论:维生素 A 缺乏可以导致新生大鼠枕颈部结构发育异常,这可能与其胚胎发育期 Hoxd3基因 mRNA 表达水平下降有关,但其具体的分子生物学机制还有待进一步研究。
维生素 A 缺乏、枕骨、颈椎、先天畸形、Hoxd3 基因、动物实验
R73;R15
国家自然科学基金项目81173423
2015-10-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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