股密葆含药血清对成骨细胞分化成熟的影响及其作用机制
目的:探讨股密葆含药血清对成骨细胞分化成熟的影响及其作用机制.方法:将20只2月龄雌性SD大鼠随机分成4组,对照组8只,高、中、低浓度股密葆组各4只.对照组按10 mL·kg-1体质量以生理盐水灌胃,高浓度组按10 mL·kg-1体质量以2 430 mg· mL-1股密葆混悬液灌胃,中浓度组按10 mL·kg-1体质量以1 215 mg· mL-1股密葆混悬液灌胃,低浓度组按10mL·kg-1体质量以607.5 mg· mL-1股密葆混悬液灌胃.每天灌胃1次,连续3d.末次灌胃后lh提取各组实验大鼠含药血清,低温保存备用.将10只新生SD大鼠处死,取其颅骨,采用多次酶消化法分离出成骨细胞.将第1代成骨细胞分别在含有对照组大鼠血清及高、中、低浓度股密葆含药血清的培养基中培养1周后,采用染色法检测碱性磷酸酶表达情况,采用Western Blotting法检测Ⅰ型胶原、Runt相关转录因子2、β连环素及转录因子4的蛋白表达情况.结果:①成骨细胞中碱性磷酸酶的表达.与对照组比较,各浓度股密葆含药血清组碱性磷酸酶染色较深,其中中浓度组染色最深.②成骨细胞中Ⅰ型胶原蛋白的表达.对照组、高浓度组、中浓度组、低浓度组Ⅰ型胶原蛋白的表达量比较,差异有统计学意义[(1.172±0.047),(2.023±0.131),(2.792±0.737),(2.235±0.525),F=6.466,P=0.016].组间两两比较,中浓度组、低浓度组高于对照组(P=0.003,P=0.022);高浓度组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.052);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).③成骨细胞中Runt相关转录因子2蛋白的表达.各组Runt相关转录因子2蛋白的表达量比较,差异有统计学意义[(1.968±0.263),(2.255±0.286),(2.675±0.181),(2.652±0.211),F=6.066,P=0.019].组间两两比较,中浓度组、低浓度组高于对照组(P=0.007,P=0.008);高浓度组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.180);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).④成骨细胞中β连环蛋白的表达.各组β连环蛋白表达量比较,差异有统计学意义[(1.571±0.140),(2.264±0.265),(2.783±0.432),(2.860±0.576),F=6.980,P=0.013].组间两两比较,中、低浓度组均高于对照组(P =0.005,P=0.004);高浓度组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.061);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).⑤成骨细胞中转录因子4蛋白的表达.各组转录因子4蛋白表达量比较,差异有统计学意义[(3.268±0.298),(3.941±0.360),(4.446±0.443),(4.186±0.249),F=6.431,P=0.016].组间两两比较,高、中、低浓度组均高于对照组(P=0.044,P=0.003,P=0.012);其余各组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:适当浓度股密葆含药血清可促进成骨细胞的分化,其作用机制或许与Wnt/β连环素信号通路的激活有关.
股骨头坏死、成骨细胞、股密葆、含药血清、碱性磷酸酶、胶原Ⅰ型、Runt相关转录因子2、β连环素、转录因子4
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H31;R73
国家自然科学基金项目81073114,81072830;江苏省中医药管理局2010年度康缘中医药科技创新基金HZ1013KY;苏州市科技计划项目SYS201257
2014-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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