戴村骨伤膏提取液对胎盘源性间充质干细胞成骨诱导分化的影响

摘要：

目的:为了研究戴村骨伤膏对骨折愈合的影响,我们通过人胎盘源性间充质干细胞(hPMSC)的体外细胞试验,观察药物对干细胞成骨诱导分化的影响.方法:在体外培养的hPMSC中,加入不同药物剂量浓度的实验药液和成骨诱导液混合液,诱导2~4周后进行检测.采用偶氮偶联法进行碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞形成.Von Kossa染色法鉴定钙结节形成.以鼠抗人I型胶原单克隆抗体为一抗,羊抗鼠SABC为二抗,进行免疫组织化学染色.用流式细胞仪检测细胞表面标志.结果:hPMSC在诱导培养基培养条件下3 d出现细胞变粗,1周后细胞变为多角形或者是圆锥形,周边出现丝状突出,2周可见细胞基质矿化物逐渐出现,形成多层小结结构.实验2周后细胞基质内出现钙化,4周Von Kossa染色钙结节阳性,程度随药物剂量递增,药物诱导组(50 mg·L-1)可见大量的黑色钙结节,单纯诱导组可见少量黑色钙结节形成,而对照组在任何时间都没有阳性反应.药物诱导2周后细胞碱性磷酸酶染色阳性,并且程度与药物剂量成正比,而单纯诱导液组的染色为弱阳性,未经诱导的显示阴性.经流式细胞术检测细胞表型发现经诱导而成的成骨细胞细胞表型无改变,表明其来源来自间充质干细胞.结论:戴村骨伤膏提取液能促进胎盘源性间充质干细胞成骨诱导分化,并且随药物剂量增加而效果提高.

关键词：戴村骨伤膏、提取液、胎盘源性间充质干细胞、骨诱导

所属期刊栏目：22

分类号：R24;R6

资助基金：浙江省中医药科技计划项目2007CB201

在线出版日期：2010-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3-6