一种神经元轴突变性的量化分析方法

摘要：

目的 建立一种神经元轴突变性的量化分析方法.方法 采用Aβ25-35(10-7、10-6、10-5 mol/L)诱导的大鼠原代海马神经元轴突变性模型,经神经元特异性标记蛋白βⅢTubulin免疫荧光染色获得神经元形态学荧光图像.荧光图像经二维消卷积和二元化处理,将荧光标记的神经元区域转变为黑色并测量其面积,即为神经元总面积.应用ImageJ软件的颗粒分析功能测量轴突变性产生的片段和颗粒面积,并计算其占神经元总面积的百分比,即可获得神经元轴突变性的量化数据,命名为变性指数(degeneration index,DI).Western blot测定突触后致密蛋白95(postsynaptic density 95,PSD95)和突触素(synaptophysin,SYN)蛋白变化.Pearson法分析DI与PSD95、SYN变化的相关性.结果 免疫荧光染色结果显示Aβ25-35可诱导海马神经元轴突变性,DI显著高于对照组并呈剂量依赖性,PSD95和SYN蛋白水平显著降低,与DI变化呈显著正相关.结论 本方法可获得准确的神经元轴突变性的量化数据.

关键词：神经元、轴突变性、Aβ25-35、变性指数、免疫荧光、消卷积

所属期刊栏目：40

分类号：Q189(寄生生物学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81473201;贵州省教育厅“125”重大科技专项2012012

在线出版日期：2017-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：440-445