10.13193/j.issn.1673-7717.2021.11.046
基于PI3K/Akt信号通路探讨参麦注射液干预退行性膝骨关节炎的机理研究
目的 探究参麦注射液通过调节PI3K/AKT信号途径在骨关节炎(osteoarthritis,OA)动物模型的作用机制.方法 30只兔随机分为Sham组、OA组和OA+参麦注射液组(n=10).OA组和OA+参麦注射液组兔关节腔内注射碘乙酸钠制作兔OA模型,OA+参麦注射液组使用参麦注射液灌胃.比较各组兔膝关节水肿和承重情况,通过甲苯胺蓝染色检测骨关节病变和软骨损伤.利用酶联免疫吸附法检测血清炎性细胞因子.分别通过qPCR和Western Blot检测PI3 K/AKT通路.人软骨细胞SW1353分为4组:对照组、模型组、参麦注射液组和参麦注射液+LY294002组.在培养基中加入10 ng/mL的IL-1β培养24h构建体外OA模型,参麦注射液组培养基中加入参麦注射液带药血清,参麦注射液+ LY294002组利用LY294002预培养24 h抑制PI3K/AKT通路.检测各组细胞的PI3K/AKT通路和炎性因子水平.结果 3组兔的各项指标差异有统计学意义(P<0.05).OA组的膝盖水肿[(3.79±0.41) mm]和膝关节承不对称性[(23.14±2.87)g]显著高于Sham组(P<0.05).OA+参麦注射液组的膝盖水肿[(2.61±0.38) mm]和膝关节承不对称性[(15.48±2.51)g]显著低于OA组(P<0.05).OA模型兔出现软骨损伤,OA+参麦注射液组的软骨损伤情况有所缓解.OA组的IL-1β[(29.21±4.08) pg/mL]、IL-6[(16.22±3.05) pg/mL]和TNF-α[(22.85±4.26) pg/mL]显著高于Sham组(P<0.05),OA+参麦注射液组的IL-1β[(15.32±3.57) pg/mL]、IL-6[(10.07±2.38) pg/mL]和TNF-α[(14.78±3.52) pg/mL]显著低于OA组(P<0.05).OA组的PI3K和AKT mRNA和蛋白磷酸化的水平显著高于Sham组(P<0.05),OA+参麦注射液组的PI3K和AKT mRNA和蛋白磷酸化的水平显著低于OA组(P<0.05).四组细胞的各项指标差异显著(P<0.05).模型的PI3K和AKT mRNA和蛋白磷酸化的水平、炎性因子水平显著高于对照组(P<0.05),参麦注射液组和参麦注射液+LY294002组PI3K和AKT mRNA和蛋白磷酸化的水平、炎性因子水平显著低于Sham组(P<0.05),并且参麦注射液组和参麦注射液+LY294002组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 参麦注射液可以通过抑制PI3K/AKT通路抑制炎性反应,从而缓解软骨损伤,减轻OA兔模型的症状.
骨关节炎;参麦注射液;软骨;PI3K/AKT
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R285.5(中药学)
广东省中医药局科研项目20161033
2022-01-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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197-201,后插16