基于ERK/CREB信号通路探讨艾灸肾俞穴改善去卵巢合D-半乳糖阿尔茨海默病样大鼠神经元丢失的机制研究

摘要：

目的 研究艾灸肾俞穴通过激活海马区ERK/CREB信号通路改善去卵巢合D-半乳糖腹腔注射诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)样大鼠学习记忆能力及神经元丢失的机制研究.方法 选用3月龄SD雌性未孕大鼠40只,随机分为正常组、模型组、肾俞组、抑制剂组,每组10只.除正常组外,其他3组均摘除双侧卵巢,术后3d,每日按照150 mg· kg-1·d-1剂量腹腔注射D-gal(D-半乳糖)90 d建立阿尔茨海默病样大鼠模型.肾俞组自卵巢切除术后第3天起,采用直径约6 mm定制艾条,分别于双侧"肾俞"上方2～3 cm处悬灸,使局部温度维持在(41±0.5)℃,每穴10 min,每日9:00 am开始治疗,1次/d,5d为1个疗程,疗程间休息2d,共治疗12个疗程.抑制剂组是在肾俞组基础上每周皮下注射选择性ERα受体拮抗剂甲基哌啶吡唑methyl-piperidino-pyrazole (MPP),1 次/周,共12次.正常组不进行干预,但以相同的方式束缚处理.免疫组化法检测各组大鼠海马区Aβ1-42和雌激素受体α表达;尼氏染色分析各组大鼠海马区神经元数目及形态变化;免疫印迹法检测各组大鼠海马区p-CREB、p-ERK、ERK、CREB的蛋白表达.结果 干预3个月后,各组海马组织中ERK和CREB总量没有明显差异,各组逃避潜伏期均呈现随时间推移而下降.与正常组相比,从定位航行实验Day2起,模型组逃避潜伏期明显延长(P ＜0.001),穿越平台次数明显下降(P＜0.01),海马区Aβ1-42表达明显增多(P＜0.001),海马CA1、CA3区神经元数目明显下降(P＜0.001),P-ERK/T-ERK、P-CREB/T-CREB水平明显下降(P＜0.001),海马区ERα表达明显减少(P＜0.01);经治疗后,与模型组相比,从定位航行实验Day3起,肾俞组逃避潜伏期明显缩短(P ＜0.001),穿越平台次数明显增加(P＜0.01),海马内Aβ1-42表达明显减少(P ＜0.001),CA1、CA3区神经元数目明显增加(P＜0.01),P-ERK/T-ERK、P-CREB/T-CREB水平明显增加(P＜0.001),海马区ERα表达明显升高(P＜0.05);与肾俞组比较,抑制剂组逃避潜伏期明显延长(P＜0.001),穿越平台次数明显下降(P＜0.01),Aβ1-42表达明显升高(P＜0.001),CA1、CA3区神经元数目组明显减少(P＜0.05,P＜0.01),P-ERK/T-ERK、P-CREB/T-CREB水平明显增加(P＜0.01,P＜0.05),且ERα表达明显降低(P＜0.01).结论 激活海马区ERα依赖的ERK/CREB信号通路是艾灸肾俞穴改善去卵巢合D-半乳糖腹腔注射诱导的AD样大鼠学习记忆能力及神经元丢失现象的机制之一.

关键词：阿尔茨海默病、细胞外信号调节激酶类、艾灸、去卵巢、D-半乳糖

所属期刊栏目：39

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;世界针灸联合会孙国杰中医针灸传承基地项目

在线出版日期：2021-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-7,后插1-后插3