人参皂苷在神经干细胞中的干预机制及对HIF-1a-VEGF表达水平的影响研究

摘要：

目的 探讨人参皂苷在神经干细胞中的干预机制及对HIF-1a-VEGF通路的影响.方法 选择C57BL/6小鼠25只作为对象,采用颈椎脱臼法处死小鼠,完成NSCs的分离、培养、传代及鉴定.将最终获得的NSCs细胞分为观察组与对照组.对照组中常规加入DMEM/F12培养基培养,观察组细胞分别盛放在3个试管中,分别加入0.1、1、10.0 μmol/L的人参皂苷,连续进行48 h培养.采用一步法TUNEL染色测定两组NSCs凋亡情况;采用CCK法检测两组NSCs增殖能力;采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定HIF-1a、VEGF通路.结果 和结论①原代细胞倒置显微镜下细胞呈分散的圆球状,且悬浮于培养液中,细胞具有良好的折光性;细胞培养24h后部分细胞开始分裂,形成小克隆神经球;连续进行48 h培养后NSCs增殖活力旺盛,细胞直径大、规则、饱满,具有较强的折光性;在EGF与bFGF等生长因子培养基培养下,多数细胞显示小胞体,且伴有双极或多极态具有巢蛋白(绿色为巢蛋白阳性标记,蓝色为DAPI细胞核染);细胞分化培养5d后NSCs细胞成功分化为Tui-1标记神经元和GFAP标记的星形胶质细胞;②人参皂苷对于NSCs细胞凋亡率具有明显的抑制作用,且浓度越高抑制效果越明显;人参皂苷干预后NSCs细胞不同时间点凋亡率,均低于DMEM/F12培养基(P＜0.05);③不同浓度人参皂苷均能促进NSCs细胞增殖,且人参皂苷浓度越高,对NSCs细胞增殖能力越强;④人参皂苷不同浓度下NSCs细胞HIF-1a-VEGF通路,均高于DMEM/F12培养基(P＜0.05);人参皂苷浓度越高,NSCs细胞HIF-1a-VEGF通路水平越高,不同浓度下NSCs细胞HIF-1a-VEGF水平具有统计学意义(P＜0.05);⑤人参皂苷用于NSCs中能促进能促进细胞增殖、抗凋亡,且呈药物剂量依赖性,可能与提高HIF-1a-VEGF通路有关,能为NSCs细胞分离、制备提供理论依据.

关键词：人参皂苷、神经干细胞、HIF-1a-VEGF通路

所属期刊栏目：38

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：陕西省横向课题2018610002003383

在线出版日期：2020-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：191-195,后插22