10.13193/j.issn.1673-7717.2020.02.037
梓醇对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖和成软骨分化能力的影响
目的 探讨梓醇对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)体外增殖和成软骨分化能力的影响.方法 全骨髓贴壁筛选法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,并作成骨、成脂分化鉴定.CCK-8法检测25、50、100、200 μmol/L梓醇在12、24、36 h对BMSCs增殖效应,选取含50、100、150 μmol/L梓醇的经典诱导液、经典诱导液、普通培养基诱导BMSCs成软骨分化,诱导3周后,HE染色观察成软骨大小.选取相同浓度的梓醇、经典诱导液、普通培养基培养BMSCs12 h后,实时荧光定量PCR检测COL1、Aggrecan和SOX9基因表达.结果 不同浓度的梓醇对BMSCs均无毒性作用,24h后不同浓度的梓醇都可促进BMSCs增殖,随着梓醇浓度增大及作用时间的延长,BMSCs增殖也明显增加,与空白正常组比较均有统计学意义(P<0.01).HE染色观察,加入含150 μ,mol/L梓醇的经典诱导组诱导的软骨小球较单纯经典诱导液组大,而PCR结果显示与空白组比较,不同浓度组梓醇均能提高COL1、Aggrecan和SOX9基因表达(P<0.01),与经典诱导组比较,低、中剂量的梓醇组可以提高COL1基因的表达(P<0.05),高剂量梓醇可提高Aggrecan基因的表达(P<0.05),高、中、低剂量梓醇组都可以提高SOX9的基因的表达(P<0.05).然而,经典诱导组SOX9表达量与空白组比较没有明显统计学差异(P>0.05).结论 梓醇能促进大鼠BMSCs体外增殖,与时间和浓度成正相关,亦能促进大鼠BMSCs体外成软骨分化,可能与促进COL1、Aggrecan基因表达相关.
梓醇、成软骨分化、骨髓间充质干细胞、增殖、体外
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R285.5(中药学)
国家自然科学基金81473699
2020-05-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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149-153,后插18