不同蛋白提取方法对PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达量的影响

摘要：

目的:探讨Ripa裂解液蛋白提取法和Invent离心管柱蛋白提取法对慢性应激模型大鼠海马组织PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达量的影响.方法:空白组和模型组大鼠各3只,取双侧海马组织,每个样品分别采用Ripa裂解液、Invent离心管柱蛋白提取法进行蛋白提取,分为空白+Invent组、空白+Ripa组、模型+Invent组、模型+Ripa组.采用Western Blot法检测PI3 K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况,析因设计方法分析各因素的效果.结果:大鼠海马PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达均受组别和提取方法的影响,组别和提取方法存在交互作用,运用Invent离心管柱蛋白提取法提取蛋白,模型组的PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达较空白组减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:慢性应激抑制大鼠海马PI3 K/Akt/mTOR信号通路,Invent离心管柱蛋白提取法操作便捷,蛋白提取率高,尤其对信号通路中磷酸化蛋白的提取具有明显的优势.

关键词：Ripa裂解液、离心管柱法、慢性应激、信号通路

所属期刊栏目：37

分类号：R284.2(中药学)

资助基金：国家自然科学基金81673838

在线出版日期：2019-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1669-1672