当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞增殖和PI3K/AKT信号转导通路的影响

摘要：

目的:从PI3K/AKT信号转导通路探讨当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞的调控机制.方法:C57BL/6小鼠20只,雌雄各半,28～ 32 9.给模型组小鼠每日腹腔注射1次环磷酰胺380 mg· kg-1,正常小鼠腹腔注射等量生理盐水,连续3d.造模后,以脱颈椎法处死各组小鼠,取出股骨,剔除肌肉和结缔组织,剪开股骨两端,用6号针头以生理盐水反复冲洗骨髓腔,并将冲出的骨髓打碎,再用4号针头过滤制成单个细胞悬液,在离心机上2000r/min,离心10 min,去上清液,加入4 mL冷70％乙醇固定,上振荡器摇匀制成骨髓干细胞样本.细胞实验分为6组,包括正常组、模型组、EPO组、EPO+(G-CSF)组、当归多糖组、黄芪多糖组、两药配伍组.直接给药当归多糖0.2 mg/mL,黄芪多糖0.2 mg/mL,EPO 50 U/mL,(G-CSF)50 U/mL于骨髓干细胞体外培养体系中,培养3d,室内18 ～20℃,20％相对湿度,5％CO2,37℃孵育箱.采用MTT法检测骨髓干细胞生长和增殖的情况;采用ELISA检测骨髓干细胞中pPI3K和p-AKT的蛋白含量;采用RT-qPCR法检测骨髓干细胞中PBK、AKT、PTEN的mRNA表达.结果:(1)对小鼠骨髓干细胞生长和增殖的影响.①造模后24 h,各给药组与模型组比较均有明显差异.当归多糖与黄芪多糖有交互作用,合用不如单用当归多糖.②造模后48 h,各给药组与模型组比较均有明显差异,药物组之间差异均没有统计学意义.当归多糖与黄芪多糖有交互作用,合用比单一用药好.③造模后72 h,各给药组与模型组比较均有明显差异.当归多糖与黄芪多糖有交互作用,合用比单一用药好.(2)对PI3K、AKT的mRNA表达的影响.各给药组与模型组PI3K、Akt的mRNA比较均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有提升PI3K、Akt的mRNA作用,两药交互作用无统计学意义.(3)对pPI3K、p-AKT蛋白含量的影响.各给药组与模型组pPI3K、p-ATK的蛋白含量比较均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖有交互作用,合用比单一用药好.(4)对PTEN mRNA表达的影响.各给药组与模型组PTEN mRNA比较均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖交互作用明显,合用比单一用药好.结论:(1)当归多糖、黄芪多糖及其配伍能够促进化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞增殖,两药配伍的作用优于单一用药.(2)当归多糖、黄芪多糖及两药配伍能够上调PI3K、AKT mRNA的表达,增加pPI3K和p-AKT的蛋白含量,下调PTEN mRNA的表达,两药配伍的作用优于单一用药.(3)当归多糖、黄芪多糖及两药配伍激活了PI3 K/AKT信号转导通路,两药治疗化疗性骨髓抑制的作用可能与PI3K/AKT通路有关.

关键词：当归多糖、黄芪多糖、化疗、骨髓抑制、PI3K/Akt通路

所属期刊栏目：37

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：辽宁省自然科学基金20170540611

在线出版日期：2019-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1471-1478