大鼠脂肪干细胞的分离培养鉴定及多向诱导分化研究

摘要：

目的:通过体外分离培养脂肪干细胞,并进行传代、表型鉴定及多向诱导分化,进一步了解其生物学特性,为临床运用奠定实验基础.方法:取SD大鼠附睾近心端,肾周及腹股沟韧带皮下脂肪组织,采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法,对脂肪干细胞进行分离、体外培养及扩增、表型鉴定及成骨成脂诱导分化,在倒置显微镜下观察原代及传代细胞形态变化,并采用MTT法检测第3、5、7、9代细胞增殖能力,用流式细胞仪检测细胞表面抗原标记,取第3代细胞进行成骨成脂诱导分化,并采用茜素红染色、油红O染色方法进行鉴定.结果:采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法得到的脂肪干细胞,其细胞形态较为均一,基本呈长梭形,旋涡状生长,并形成集落样生长.MTT法检测第3、5、7、9代ADSCs呈典型的“S”形增殖曲线,符合干细胞的特性,脂肪干细胞表型鉴定结果显示CD29阳性高表达,CD34阴性表达,CD45低表达,CD105弱阳性表达,脂肪干细胞能向成骨细胞及脂肪细胞分化.结论:脂肪干细胞取材较方便,含量丰富、并能够在体外分离培养,其稳定表达特异性的表面抗原,并且经过相应诱导培养后可向成骨及成脂多向分化,可作为优良的骨组织工程的种子细胞来源.

关键词：脂肪干细胞、大鼠、生物学特性、表型鉴定

所属期刊栏目：35

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;浙江省姚新苗名老中医专家传承工作室建设项目;浙江省中医药重点学科建设项目;浙江省中医药局一般项目;浙江省科技厅创新团队项目;浙江中医药大学项目;浙江中医药大学附属第三医院项目

在线出版日期：2017-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2571-2575,后插14-后插15