龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制研究

摘要：

目的:研究龟鹿二仙胶对成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β表达的影响,探索龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制.方法:SD大鼠随机分为对照组、龟鹿二仙胶低剂量组、中剂量组、高剂量组、骨化三醇组,每天灌胃1次,持续7d,末次给药2h后腹主动脉采血,制成含药血清作用于大鼠成骨样细胞ROS17_2.8株.用MTT法及活细胞形态观察含药血清对成骨细胞增殖及凋亡的影响.用各组合药血清条件培养基培养成骨细胞,应用West-em Blot法检测各组成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测各组成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β mRNA的表达.结果:(1)MTT结果显示:龟鹿二仙胶各组的成骨细胞无明显增殖.骨化三醇组的成骨细胞有明显增值(P＜0.05).细胞染色提示:骨化三醇组及龟鹿二仙胶组的成骨细胞无显著的凋亡.(2)RT-PCR法结果显示:骨化三醇组与龟鹿二仙胶各组COL1A1及COL1 A2mRNA的水平均有增加(P＜0.01);龟鹿二仙胶中、高剂量组COL1A1及COL1 A2mRNA水平增加较明显(P＜0.05),龟鹿二仙胶高剂量组较中剂量组COL1A1及COL1A2mRNA水平增加不明显(P＞0.05);骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2 mRNA水平无明显变化(P＞0.05);龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2mRNA水平均有增加(P＜0.01);且龟鹿二仙胶中、高剂量组TGF-β1、TGF-β2mRNA水平增加差异无统计学意义(P＞0.05).(3)Western blot结果提示:第24 h,龟鹿二仙胶高剂量组能使成骨细胞COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P＜0.05).第48 h,骨化三醇组、龟鹿二仙胶各组均能使成骨细COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P＜0.01);龟鹿二仙胶高、中剂量组之间比较差异没有统计学意义(P＞0.05);第24、48 h,骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P＞0.05);在24 h,龟鹿二仙胶高剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成有显著增强(P＜0.01),龟鹿二仙胶低剂量和中剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P ＞0.05);48 h,龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成增加(P＜0.01).龟鹿二仙胶高中剂量组之间无显著差异(P＞0.05).结论:龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症机制可能通过调节细胞因子TGF-β,促进Ⅰ型胶原的表达,为探讨中药促胶原形成治疗骨质疏松提供细胞及分子生物学依据.

关键词：龟鹿二仙胶、成骨细胞、Ⅰ型胶原蛋白、TGF-β

所属期刊栏目：35

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：无锡市科技计划YGZXZ1517

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1008-1013,后插13