生肌玉红膏提取液促进脂肪干细胞增殖的实验研究

摘要：

目的:探查生肌玉红膏提取液对脂肪干细胞的增殖作用与机制,为构建中医药组织工程血管化支架提供前期基础.方法:实验分为空白组:仅加入细胞培养液与CCK-8溶液,对照组:空白组基础上加入细胞密度为4×104/mL P3代的脂肪干细胞悬液0.2 mL,实验组:对照组基础上加入生肌玉红膏梯度浓度为0.012 5、0.025、0.05、0.1 mg/mL的生肌玉红膏提取液.表面抗原及脂滴油红O染色与细胞茜素红S染色鉴定脂肪干细胞;CCK法测定脂肪干细胞增殖状况;流式细胞仪测定脂肪干细胞增殖周期及蛋白质印迹法(Western blot)测定脂肪干细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax及促血管生长因子VEGF的表达.结果:脂肪干细胞P3代细胞表面抗原CD34阴性,CD90阳性,油红O染色可见细胞中的脂滴且细胞茜素红S染色阳性;生肌玉红膏提取液浓度由低到高刺激脂肪干细胞增殖率逐渐增加,0.05 mg/mL时增殖达到高峰,明显高于对照组及浓度为0.012 5 mg/mL与0.025 mg/mL组(P＜0.01)及对照组;浓度为0.05 mg/mL生肌玉红膏提取液在培养后24 h与48 h脂肪干细胞细胞周期更多位于DNA合成期与合成后期,比例分别达24％与28％,高于对照组8％左右(P＜0.01)并显著促进抑制凋亡蛋白Bcl-2与凋亡蛋白Bax的比例与刺激VEGF表达.结论:生肌玉红膏具有促进脂肪干细胞增殖疗效且0.05 mg/mL生肌玉红膏提取液疗效较佳,其作用机制与抗脂肪干细胞凋亡相关.

关键词：生肌玉红膏、脂肪干细胞、增殖、细胞周期、凋亡

所属期刊栏目：35

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;康缘基金;江苏高校优势学科建设工程项目;江苏省中医院高峰学术人才培养项目

在线出版日期：2017-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：355-358,后插5