定量PCR和Western blot结合检测回药爱康方对肺癌细胞EGFR、NF-κB的表达影响

摘要：

目的:探讨定量PCR和Western blot结合检测对Lewis肺癌C57小鼠瘤细胞表皮生长因子受体(EG-FR)、NF-KB表达影响,观察该方对调节癌细胞信号转导作用机制.方法:小鼠自接种瘤株细胞24h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为:①回药高剂量组(AKH);②荷瘤模型组(对照组);③回药中剂量组(AKM);④单纯化疗药组(CTX组);⑤回药中剂量组加化疗组(AKM+ CTX);⑥回药低剂量加化疗药组(AKL+CTX);⑦回药低剂量组(AKL);⑧回药高剂量加化疗药组(AKH+ CTX).采用RT-PCR和western blot方法检测小鼠组织样本中EGFR、NF-κBmRNA转录水平和蛋白质表达的变化情况.结果:实时荧光定量PCR结果显示:与模型组小鼠比较,给予回药爱康方,高、中、低剂量干预后,小鼠瘤细胞中EGFR mRNA表达水平显著下调(P＜0.01),而低剂量对NF-κBmRNA的表达水平无统计学差异(P＞0.05),给予回药爱康方,高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX后,小鼠瘤细胞中EGFR表达水平显著下调(P＜0.01),小鼠瘤细胞中NF-κBmRNA表达水平显著上调(P＜0.01);与模型组比较,给予回药爱康方高、中、低剂量干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR、NF-κB蛋白表达水平无统计学差异性(P＞0.05),给予回药爱康方高+ CTX、中+CTX、低+CTX、CTX干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR蛋白表达水平显著下调、NF-κB蛋白表达水平显著上调(P＜0.01或P＜0.05).结论:回药爱康方高、中、低与回药开康方高+ CTX、中+CTX、低+CTX、CTX均对EGFRmRNA的表达水平有影响,仅低剂量对NF-κBmRNA的表达水平无影响,同时回药爱康方高、中、低剂量均对EGFR、NF-κB蛋白表达无影响.

关键词：PCR、Western blot、回药爱康方、EGFR、NF-κb

所属期刊栏目：34

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金81160462

在线出版日期：2017-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2831-2835,后插2