10.13193/j.issn.1673-7717.2016.07.011
黄芪甲苷、毛蕊异黄酮及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞JAK2/STAT5信号转导通路的影响
目的:从JAK2/STAT5信号转导通路探讨黄芪甲苷、毛蕊异黄酮及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞的调控机制.方法:C57 BL/6小鼠20只,雌雄各半,28 ~ 32 g.给模型组小鼠每日腹腔注射一次环磷酰胺380 mg·kg-1,正常小鼠腹腔注射等量生理盐水,连续3d.造模后,以脱颈椎法处死各组小鼠,取出股骨,剔除肌肉和结缔组织,剪开股骨两端,用6号针头以生理盐水反复冲洗骨髓腔,并将冲出的骨髓打碎,再用4号针头过滤制成单个细胞悬液,在离心机上2000 r/min,离心10 min,去上清液,加入4 mL冷70%乙醇固定,上振荡器摇匀制成骨髓干细胞样本.细胞实验分为6组,包括正常组,模型组,“EPO+(G-CSF)”对照组,毛蕊异黄酮组,黄芪甲苷组,两药配伍组.直接给药黄芪甲苷0.2 mg/mL、毛蕊异黄酮0.01 mg/mL、EPO 50 U/mL、(G-CSF)50U/mL于骨髓干细胞体外培养体系中,培养3d,室内18 ~ 20℃,20%相对湿度,5% CO2,37℃孵育箱.采用蛋白质印迹Western-blot检测pJAK2和pSTAT5的蛋白表达,采用RT-qPCR法检测骨髓干细胞中SOCS3的mRNA表达.结果:(1)对SOCS3mRNA表达的影响.与模型组比较,正常组和各治疗组均有明显差异(P<0.05).治疗组之间比较,毛蕊异黄酮组、黄芪甲苷组、两药配伍组3组之间的两两比较均无显著差异(P>0.05).与对照组比较,黄芪甲苷组、蕊异黄酮组、两药配伍组均无显著差异(P>0.05).(2)对pJAK2蛋白表达的影响.与模型组比较,正常组和各治疗组均有明显差异(P<0.05).治疗组之间比较,3组之间的两两比较均无显著差异(P>0.05).与对照组比较,毛蕊异黄酮组、两药配伍组均无显著差异(P>0.05).(3)对pSTAT5蛋白表达的影响.与模型组比较,正常组和各治疗组均有明显差异(P<0.05).治疗组之间比较,毛蕊异黄酮组、黄芪甲苷组、两药配伍组3组之间的两两比较均无显著差异(P>0.05).与对照组比较,黄芪甲苷组、蕊异黄酮组、两药配伍组均无显著差异(P>0.05).结论:黄芪甲苷、毛蕊异黄酮及其配伍通过促进pJAK2、pSTAT5蛋白表达,下调SOCS3 mRNA表达,保护化疗后骨髓抑制,促进骨髓造血损伤修复.
黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、化疗、骨髓抑制、调控机制
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R285.5(中药学)
国家自然科学基金81273653
2016-08-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1576-1580