大蒜素抗人肝癌HepG-2细胞的实验研究

摘要：

目的:研究大蒜素对人肝癌细胞HepG-2生长的影响,探讨其抗人肝癌HepG-2细胞作用以及相关机制.方法:选用人肝癌HepG-2细胞为研究对象.通过倒置显微镜及hoechst染色荧光显微镜观察大蒜素作用后细胞形态的变化.MTT法检测不同浓度大蒜素作用后细胞增殖活性改变并计算抑制率(IR).流式细胞术(FCM)检测大蒜素对细胞周期及凋亡率的影响.免疫细胞化学染色了解大蒜素作用后HepG-2细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的变化.结果:大蒜素作用24 h后人肝癌HepG-2细胞形态发生改变,表现为细胞缩小变圆,突起消失,分部稀疏,细胞核浓缩,边缘化,且随着大蒜素浓度增加,上述改变逐步明显.Hoechst染色荧光倒置显微镜观察对照组细胞核呈均匀一致的荧光,而实验组可观察到细胞凋亡形态变化,表现为细胞核固缩,染色质凝聚,边缘化,部分碎裂,呈致密的颗粒状强荧光.MTT法检测结果显示不同浓度的大蒜素(12.5 μg/mL、25μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL)在不同时间(24 h、48 h、72 h)作用于HepG-2细胞后细胞增殖活性受到抑制,与阴性对照组及阳性对照组相比大部分组别差异有统计学意义.流式细胞仪检测结果提示与阴性对照组相比大蒜素组G0-G1期比例明显增加,细胞凋亡率明显上升.免疫细胞化学染色表明大蒜素作用后细胞Bax表达水平上升,Bcl-2/Bax比例下降,Caspase-3表达上升.结论:大蒜素对人肝癌HepG-2细胞的增殖有抑制作用,并能诱导HepG-2细胞凋亡.在一定范围内随着大蒜素浓度的增高,时间的延长,细胞增殖活性逐步降低,凋亡率逐步上升,呈时间-剂量依赖性.大蒜素抑制肝癌细胞增值诱导其凋亡与G0-G1期阻滞有关,经大蒜素作用后G0-G1期细胞比例明显高于对照组,其分子机制涉及上调Bax、Caspase-3表达.

关键词：大蒜素、HepG-2细胞、增殖、凋亡、Bcl-2、Bax、Caspase-3

所属期刊栏目：32

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2014-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1763-1767,后插13-后插15