黄芪甲苷联合大黄素通过Smads通路抑制TGF-β1诱导的足细胞凋亡

摘要：

目的:探讨黄芪甲苷联合大黄素是否通过Smads通路抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导小鼠足细胞株凋亡.方法:①体外培养小鼠足细胞株.②应用不同浓度TGF-β1(10-1 ～104 ng/L)诱导小鼠足细胞凋亡.③TGF-β1不同刺激时间(12、24、48 h)诱导小鼠足细胞凋亡.④黄芪甲苷、大黄素联用抑制TGF-β1诱导小鼠足细胞凋亡,实验分为正常组、TGF-β1组、黄芪甲苷+TGF-β1组(黄芪甲苷组)、大黄素+TGF-β1组(大黄素组)、黄芪甲苷+大黄素+ TGF-β1组(黄芪甲苷+大黄素组).⑤采用流式细胞仪检测Annexin V、Caspase 3.⑥实时定量PCR及Western印迹法检测Smad2、Smad3 mRNA及蛋白质表达.结果:①随着TGF-β1浓度增加(10-1～ 104ng/L)、刺激时间增加,足细胞凋亡比率增多(P＜0.05),足细胞Smad2、Smad3 mRNA表达增加.TGF-β1103 ng/L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24 h为最佳诱导凋亡时间.②TGF-β1组与正常组相比Caspase 3阳性细胞比率增加(P＜0.01);Smad2、Smad3蛋白质表达明显增加(P＜0.01).③)黄芪甲苷+大黄素组与TGF-β1组、黄芪甲苷组、大黄素组比较:足细胞凋亡比率明显减少(P＜0.05);Caspase 3阳性细胞比率减少(P＜0.05);Smad2、Smad3蛋白质表达减少(P＜0.05).④黄芪甲苷+大黄素组较TGF-β1组Smad2、Smad3 mRNA表达减少.结论:①TGF-β1能通过Smads通路诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性.②黄芪甲苷联合大黄素能通过Smads通路阻断足细胞凋亡,其机制可能与减少TGF-β1的表达,阻止其激活Smads蛋白,从而阻止Caspase家族诱导的足细胞凋亡有关.

关键词：黄芪甲苷联合大黄素、Smads通路、TGF-β、足细胞凋亡

所属期刊栏目：32

分类号：R258.8(中医内科)

在线出版日期：2014-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1089-1093