肾康注射液对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损害的研究

摘要：

目的:探讨肾康注射液(SKI)对马兜铃酸(AA)导致肾小管上皮细胞损伤的影响.方法:以90％DMEM培养液加10％胎牛血清培养人肾小管上皮细胞系(HK-2),加入不同浓度的SKI(终浓度分别为4、6、8mg/mL)和AA(终浓度为10、20、40 μg/mL)培养48h.采用MTT法观察HK-2细胞活性;根据MTT法检测细胞活性的结果,选择SKI最佳干预浓度8 mg/mL和AA致细胞明显凋亡浓度20 μg/mL,将实验分为3组,①对照组:培养液不加马兜铃酸;②AA干预组:在培养液中加入AA(终浓度为20 μg/mL);(3)SKI治疗组:在培养液中加入AA(终浓度为20 μg/mL)和SKI(终浓度为8 mg/mL).用透射电镜观察3组细胞的超微结构;应用流式细胞术检测细胞凋亡百分率;分别采用实时定量荧光PCR及Western-blot技术检测凋亡蛋白Caspase-3 mRNA及蛋白的表达情况.结果:与对照组比较,AA干预组细胞结构发生改变,治疗组大部分细胞结构基本正常,部分细胞结构改变明显.AA浓度超过10 μg/mL时,HK-2细胞的活性显著抑制.分别以不同浓度4,6,8mg/mL的SKI和AA(20 μg/mL)处理HK-2细胞后,则细胞活性明显增加,而且随着SKI浓度的增加其作用愈趋明显(P＜0.05).与对照组比较,AA组凋亡细胞的比例明显增加(P＜0.05),SKI治疗组凋亡细胞的比例也增加,但比AA组细胞凋亡的比例明显减少.AA组Caspase-3 mRNA及蛋白的表达较对照组明显增高;治疗组Caspase-3 mRNA及蛋白的表达较AA组降低.结论:肾康注射液通过降低凋亡蛋白Caspase-3 mRNA及蛋白的表达抑制HK-2细胞的凋亡,明显提高HK-2细胞抵抗AA致细胞损伤的能力,起到保护HK-2细胞的作用.该途径可能为肾康注射液抑制HK-2细胞凋亡的机制之一.

关键词：马兜铃酸、肾小管、上皮细胞、肾康注射液

所属期刊栏目：31

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：青岛市科技局资助项目09-1-1-1-nsh

在线出版日期：2013-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2535-2538,后插3