同种异体骨髓间充质干细胞穴位移植1天与7天对急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的对比研究

摘要：

目的:进行兔骨髓间充质干细胞(MSCs)穴位移植1天与7天对梗死区心肌细胞凋亡的对比研究.方法:将已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔随机分为3组,包括模型组、穴位移植干细胞1天组、穴位移植干细胞7天组.用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死模型,将梗死后的兔分两组分别在1天与7天穴住注射相同数量的已经过分离、培养、扩增、标记后的MSCs悬液.采用脱氧核苷酸末端转移酶介导原位缺口标记(TUNEL法)确定细胞凋亡数,免疫组化SABC方法及RT-PCR和蛋白印迹法观察心肌细胞中Fas、FasL、Bcl-2蛋白及mRNA的表达.结果:(1)免疫组化示:梗死区凋亡细胞的表达,模型组高于正常组、穴位注射干细胞1天组和穴位注射干细胞7天组(P<0.05),穴位注射干细胞7天组低于穴位注射干细胞1天组(但无统计学差异P>0.05);Fas蛋白的表迭,模型组高于正常组、穴位注射干细胞1天组和穴位注射干细胞7天组,穴位注射干细胞7天组低于穴位注射干细胞1天组(P<0.05);FasL蛋白的表达,穴位注射干细胞1天组高于正常组、模型组、穴位注射干细胞7天组(P<0.05);Bcl-2蛋白的表达,模型组低于正常组、穴位注射干细胞1天组和穴位注射干细胞7天组(P<0.05),穴位注射干细胞7天组高于穴位注射干细胞1天组(但无统计学差异P>0.05).(2)RT-PCR与Western Blotting均显示:Fas、FasL、Bcl-2蛋白mRNA的表达穴位移植干细胞1天均高于穴位移植干细胞7天组.结论:(1)穴位移植骨髓间充质干细胞可使梗死及周围区心肌细胞凋亡数减少,其机制可能是通过Fas、FasL蛋白的减少、Bcl-2蛋白的增多来调节的.(2)穴位移植骨髓间充质干细胞7天较穴位移植骨髓问充质干细胞1天更能减少凋亡细胞的数量.

关键词：骨髓间充质干细胞、心肌梗死、细胞凋亡、TUNEL、Fas、FasL、Bcl-2、免疫组织化学、RT-PCR、蛋白印迹法、FasmRNA、FasLmRNA、Bcl-2mRNA

所属期刊栏目：27

分类号：R-33(医学研究方法)

在线出版日期：2009-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1364-1368