miR-4483靶基因鉴定及其抗肝纤维化机制研究

摘要：

目的 分析并鉴定miR-4483对TIMP-1表达水平的靶向调控作用,并探讨miR-4483的抗肝纤维化机制.方法 应用生物信息学方法预测miR-4483靶基因为TIMP-1.采用重叠PCR技术将靶基因3”UTR片段克隆至pGL3-M载体构建野生型及突变型重组质粒,和pRL-TK、miRNA前体共转染入大鼠肝星状细胞系HSC-T6,检测荧光素酶的表达.将miRNA前体转染HSC-T6后检测TIMP-1的mRNA和蛋白质表达水平.结果 酶切和测序证实重组质粒构建成功,共转染miR-4483前体组可下调野生型质粒的荧光素酶活性(P＜0.05),不影响突变型质粒的荧光素酶活性,而共转染miR-NC组,突变型质粒和野生型质粒荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P＞0.05);上调miR-4483水平后,TIMP-1 mRNA和蛋白的表达水平与转染miR-NC和空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TIMP-1是miR-4483的靶基因,miR-4483通过负向调控TIMP-1表达而起到抗肝纤维化作用.

关键词：miR-4483、肝纤维化、TIMP-1、荧光素酶报告

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在线出版日期：2014-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：41-44