RNA干扰介导的人肺腺癌A549细胞FasL基因沉默及意义

摘要：

目的 构建针对肿瘤凋亡基因FasL的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究RNA干扰技术对人肺腺癌A549细胞FasL mRNA表达的抑制作用,探索Fas/FasI途径在肺癌转移中的作用机制.方法 依据siRNA靶序列的设计原则,以FasL mRNA为靶基因,合成2对编码短发夹结构的两条DNA序列,经退火合成DNA双链,再克隆至siRNA表达质粒pSilencer2.0中,转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定.用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株,采用实时荧光定量PCR检测细胞FasL mRNA水平的变化.结果 成功构建发卡样FasL siRNA真核表达载体,转染人肺腺癌A549细胞后,FasL mRNA的表达水平显著下降.结论 成功构建的FasL基因siRNA真核表达载体pSi2.0-FasL能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasL mRNA的表达.

关键词：FasL基因、RNA干扰、表达载体、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：36

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2009-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：22-24