慢病毒RNAi载体的制备及滴度测定方法的建立

摘要：

目的 构建可用于神经系统基因功能研究和基因治疗的慢病毒RNAi载体系统,并建立一种方便、快捷的慢病毒滴度测定方法 .方法 三质粒系统:PLK0.1-puro、△8.2、水疱性口炎病毒G糖蛋白(VSV-C)共转染293T细胞,产生慢病毒RNAi载体颗粒,超速冷冻离心浓缩;将病毒颗粒进行系列稀释后感染Eca9706细胞,采用嘌呤霉素最小致死量筛选病毒感染细胞的方法 ,进行慢病毒滴度测定.结果 完成了慢病毒RNAi载体的包装及浓缩,确定了嘌呤霉素对Eca9706细胞的最小致死浓度为2.7 μg/ml,并应用该浓度测得病毒颗粒的滴度为107TU/ml.结论 成功构建了一种慢病毒RNAi载体,并建立了一种可行的慢病毒滴度测定方法.

关键词：慢病毒载体、RNA干扰、滴度测定、嘌呤霉素

所属期刊栏目：34

分类号：R4(临床医学)

资助基金：河南省教育厅自然科学基金

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：32-33