CRISPR/Cas9技术基因敲除细胞模型在结肠癌细胞转移表型研究中的应用

摘要：

目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，建立结肠癌SW1116细胞系VDR、FoxM1基因敲除的重组体细胞系，并进一步明确CRISPR/Cas9技术能否用于肿瘤细胞转移表型的研究。方法:针对VDR和FoxM1基因设计sgRNA，构建sgRNA质粒后与pMJ920质粒共转染至SW1116细胞系。培养48h后，通过流式分选出GFP阳性细胞，有限稀释培养出单克隆细胞系。Western Blotting验证、基因测序对比获得VDR、FoxM1稳定敲除的单克隆细胞。划痕愈合、Transwell小室实验检测该细胞的迁移和侵袭能力变化。结果:成功获得VDR和FoxM1蛋白表达缺失的SW1116－VK和SW1116－FK重组体癌细胞；VDR蛋白表达缺失后，SW1116细胞的迁移和侵袭能力增强；FoxM1蛋白表达缺失后，SW1116细胞的迁移和侵袭能力减弱。结论:利用CRISPR/Cas9技术成功构建了VDR和FoxM1敲除的SW1116细胞系；CRISPR/Cas9基因编辑技术可以用于研究基因对于肿瘤细胞转移能力的影响。

关键词：CRISPR/Cas9、转移、维生素D受体、FoxM1

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在线出版日期：2021-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：12-18