基于网络药理学和细胞实验探究补肾清透方治疗慢性乙型肝炎病毒携带状态的作用机制

摘要：

目的 以网络药理学的方法探讨补肾清透方(Bushen Qingtou Prescription)治疗慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)携带状态的核心靶点及信号通路等,进一步采用细胞实验验证预测靶点.方法 通过TCMSP、BATMAN和GeneCards数据库分别得到补肾清透方的药物活性成分、药物与疾病靶点,并将药物与疾病的交集靶点上传至STRING数据库以获取蛋白质-蛋白质相互作用图.运用DAVID6.7数据库对交集靶点富集分析,Cytoscape3.7.2软件构建"药物-成分-共同靶点-疾病"网络图以获得核心活性成分及核心靶点,并通过AutoVina软件对核心靶点及活性成分进行分子对接.此外,观察补肾清透方对HepG2-HBx细胞系中HBx的影响,并使用蛋白免疫印迹法验证核心靶点蛋白的表达水平.结果 共得到补肾清透方治疗HBV携带状态的191个活性成分,478个药物靶点、1 705个疾病靶点,213个交集靶点.富集分析共涉及734个生物过程,86个细胞组分,141个分子功能,138条KEGG通路,通路主要与TNF、HIF-1、TOLL样受体等信号通道有关.网络图表明核心活性成分为槲皮素、木犀草素、山柰酚和β-谷甾醇,核心靶点为COX-2、COX-1及AR.分子对接结果显示核心成分及核心靶点的大多数结合能≤-5.0kcal·mol-1,展现出较好的亲和力.细胞实验结果表明与空白组比较,HBx、COX-2表达在补肾清透方50μg·mL-1组稍下降(P＜0.05),在100、200 μg·mL-1两组中明显下降(P＜0.01),COX-1表达在用药组中均明显升高(P＜0.01),AR表达则无明显变化(P＞0.05).结论 补肾清透方可以通过多成分、多靶点及多通路防治HBV携带状态,而COX-2表达的下调及COX-1表达的上调可能是其发挥抗病毒作用的主要机制.

关键词：补肾清透方、慢性乙型肝炎病毒(HBV)、网络药理学、HepG2-HBx、细胞实验、作用机制

所属期刊栏目：33

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家科技重大专项2018ZX10725505-002

在线出版日期：2023-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1654-1664